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文檔簡介
1、蛹蟲草基質(zhì)多糖是優(yōu)良的保健調(diào)節(jié)劑,能提高機體的免疫、抗氧化功能,并且對正常細胞無毒副作用。近年來,人們已發(fā)現(xiàn)多種真菌多糖的生物活性與其結(jié)構(gòu)和溶液中的分子鏈構(gòu)象有密切關(guān)系。納米硒是一種高效低毒的優(yōu)于無機硒和有機硒的硒形態(tài),具有獨特的光電功能以及良好的生物活性,已成為材料、電子、醫(yī)學(xué)、生物、化學(xué)等多學(xué)科鄰域研究的焦點和前沿。我們以廢棄的蛹蟲草培養(yǎng)基質(zhì)為原料,從中提取多糖,作為穩(wěn)定劑和包覆試劑,在比較溫和的氧化還原體系中制備硒納米粒子,并對其
2、生物活性進行初步探索。
1.首先研究了蛹蟲草基質(zhì)多糖的高效提取,通過復(fù)合酶法(纖維素酶、果膠酶)協(xié)同超聲波法從廢棄的蛹蟲草培養(yǎng)基質(zhì)中提取基質(zhì)多糖,對提取工藝進行優(yōu)化。利用Box-benhnken中心組合試驗設(shè)計優(yōu)化基質(zhì)多糖的提取工藝,建立了復(fù)合酶添加量、酶解-超聲溫度、pH值、酶解-超聲時間的四因素回歸模型,確定了最佳提取工藝為在料液比為1∶30的條件下,復(fù)合酶添加量3%、酶解-超聲溫度54℃、pH值6.0、酶解-超聲時間50
3、min的最佳提取條件下,蛹蟲草基質(zhì)多糖得率為26.38%。
2.以蛋白脫除率、多糖損失率和清除DPPH自由基的能力為指標,比較Sevag法,三氯乙酸(TCA)法,木瓜蛋白酶-Sevag法以及木瓜蛋白酶-TCA法脫除從蛹蟲草的廢棄固體培養(yǎng)基中提取的蟲草基質(zhì)粗多糖蛋白的效果。結(jié)果表明:木瓜蛋白酶-TCA法脫蛋白效果最好。粗多糖經(jīng)木瓜蛋白酶處理過后,TCA法脫除蛋白1次時,蛋白脫除率為92.90%,多糖損失率為9.82%,清除DPP
4、H自由基能力為55.20%,得到蛹蟲草基質(zhì)多糖(CMSP)。
3.為了得到理想形貌和粒徑并能夠穩(wěn)定保存的蛹蟲草基質(zhì)多糖納米硒復(fù)合物(CMSP-SeNPs),以提取出的蛹蟲草基質(zhì)多糖為調(diào)控劑和修飾劑,以納米硒粒子的粒徑分布、平均粒徑、分散性和穩(wěn)定性為指標,進行單因素實驗。確定了在蛹蟲草基質(zhì)多糖濃度為10mg/mL,混合時間為4h,亞硒酸濃度為1.0M,滴加速度為1.5rpm的條件下時,能夠制備出含硒量為54.8mg/L的蛹蟲草基
5、質(zhì)多糖納米硒復(fù)合物,以分散均勻的球形顆粒存在,粒徑均一,分散性好,穩(wěn)定性高,基質(zhì)多糖和納米硒粒子是以較弱的物理吸附方式結(jié)合在一起。
4.以對DPPH和羥自由基的清除能力以及對人宮頸癌細胞株Hela、乳腺癌細胞株MCF-7和人肺腺癌細胞株A549的細胞毒作用為指標,考察了四種粒徑大小不同的CMSP-SeNPs的體外抗氧化和抗腫瘤能力。結(jié)果顯示,最小粒徑CMSP-SeNPs(d)對DPPH和羥自由基的清除能力均大于CMSP、Na2
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