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1、該研究共分三部分:第一部分髓鞘素的提取與鑒定,采用不連續(xù)梯度離心的方法從新鮮牛脊髓中提取髓鞘素,用SDS-PAGE分子量蛋白電泳和致敏豚鼠的方法檢測(cè)髓鞘素的主要成分和抗原活性,結(jié)果顯示,髓鞘素的主要成分為大分子量MBP,并具有很強(qiáng)的抗原活性;第二部分EAE動(dòng)物模型的制備,以GPSCH為抗原,通過(guò)足底皮內(nèi)注射的方式致敏大鼠,成功地誘導(dǎo)出EAE模型;第三部分口服髓鞘素防治EAE及口服免疫耐受機(jī)制的研究,于免疫前7、5、2天、免疫日及免疫后2
2、、5、7天給大鼠口服髓鞘素,口服劑量為5mg/只/次,總量35mg/只,觀察動(dòng)物發(fā)病情況,于免疫后第14天(PI14d),將動(dòng)物全部處死,用RT-PCR半定量法,檢測(cè)外周淋巴細(xì)胞因子的表達(dá)情況,同時(shí)對(duì)中樞神經(jīng)系統(tǒng)進(jìn)行常規(guī)HE染色、NADPH-d組化染色、原位細(xì)胞凋亡檢測(cè),所得各項(xiàng)結(jié)果分別同對(duì)照組比較,并進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理.口服髓鞘素使大鼠體內(nèi)Th1型細(xì)胞因子表達(dá)水平下調(diào),Th2型細(xì)胞因子表達(dá)水平上調(diào),同時(shí)抑制CNS內(nèi)nNOS活性增加,從而在
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