1、研究背景和目的：冠心病的發(fā)生是多種危險因素長期作用的結果所導致的。對冠心病的研究，是當前心血管領域里研究的焦點。血管內皮細胞功能失調幾乎貫穿于各個冠心病發(fā)病學說之中，被廣泛認為是冠心病發(fā)病進程中最重要的始動環(huán)節(jié)。人體內多種因素均不可避免地造成內皮細胞損傷。而人體內存在的內皮損傷后修復機制在防止各種危險因素累積以及各種病理效應疊加的過程中發(fā)揮著重要作用。血管內皮細胞生長因子及其受體系統(tǒng)在血管生成和內皮損傷修復過程中至關重要。VEGF與受體

2、結合后，誘導血管內皮細胞的分裂增殖，從而發(fā)揮VEGF的生物學活性。KDR是2型VEGF受體，主要表達于內皮細胞，介導VEGF的生物學效應，在血管生成和修復中起了關鍵作用。VEGF及KDR在動脈粥樣硬化斑塊中高表達，并與斑塊破裂有關，參與了冠狀動脈粥樣硬化過程。已有數(shù)據(jù)庫顯示KDR基因含有多個SNP位點，生物信息學提示某些SNP位點可能影響蛋白分子VEGFR2的表達情況及功能。本研究中，我們推測KDR基因啟動子區(qū)天然存在的多態(tài)性位點SNP

3、-604以及編碼區(qū)多態(tài)性位點SNPll92和SNPl719可能與冠心病的個體遺傳易感性有關。 研究方法：我們采用病例對照研究的方法分析了KDR基因-604SNP位點。其中包括兩個獨立的病例-對照人群：665例冠心病患者(191例急性冠脈綜合征和474例穩(wěn)定型冠心病)和1013例正常對照；369例冠心病患者和625例正常對照?；蚍中筒捎肞CR結合限制性內切酶消化的方法，并通過抽樣測序驗證。同時我們通過熒光素酶報告系統(tǒng)研究ELIS

4、A方法檢測血清VEGFR水平驗證了啟動子區(qū)SNP-604對啟動子活性的影響，利用凝膠阻滯電泳分析(EMSA)證明了啟動子區(qū)SNP-604位點附近序列與核蛋白(推測含一種以上轉錄因子)結合，另外我們構建了編碼區(qū)SNP位點突變型和野生型載體，通過配體-受體結合試驗證明了編碼區(qū)2個SNP位點影響VGEFR2與VEGF的結合效率。 研究結果：實驗結果顯示這3個SNP位點均與冠心病風險相關，在第一個病例-對照人群中SNP-604的OR=1

5、.37(p=0.006)， SNP1192的OR=1.41(p=0.011)，SNP1719的OR=1.37(p=0.007)，在第二個病例-對照人群中SNP.604的OR=1.40(p=0.015)，SNP1192的OR=1.75(p=0.003)，SNPl719的OR=1.50(p=0.010)。此外，功能學研究顯示SNP-604降低了KDR基因啟動子活性，其中等位基因為C基因型的KDR啟動子活性比T基因型低68％，同時ELISA結