1、鄭州大學(xué)碩士學(xué)位論文ACA對人乳腺癌細胞MCF7作用及其機制的實驗研究姓名：申莉申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學(xué)指導(dǎo)教師：張明智華海嬰20090501鄭州人學(xué)2009屆碩I：學(xué)位論文中義摘要細胞增殖及凋亡的影響，并運用細胞生物學(xué)、分子生物學(xué)的方法觀察ACA對Bcl2、Bax基因表達的影響，探討其可能的分子機制，為進一步體內(nèi)研究和臨床應(yīng)用提供實驗依據(jù)。目的觀察不同濃度ACA對MCF7細胞的生長抑制作用和誘導(dǎo)凋亡作用以及對Bcl2、Bax基因

2、表達的影響，初步探討其誘導(dǎo)凋亡的機制。方法1MTT法檢測ACA對MCF7細胞的生長抑制作用實驗分兩組：①藥物組：加入不同濃度的ACAI②對照組：加入等體積含等容積DMSO的培養(yǎng)液。每個濃度設(shè)8個平行孔，ACA作用于MCF7細胞24h后，測定吸光度(A)值，計算細胞的生長抑制率和藥物的ICsD。2應(yīng)用倒置顯微鏡、HE染色法觀察ACA對MCF7細胞形態(tài)學(xué)的影H向；流式細胞儀分析細胞周期及凋亡率的變化：免疫細胞化學(xué)法檢澳JJACA對MCF7細

3、胞內(nèi)凋亡相關(guān)蛋白Bcl2$HBax蛋白表達的影響；RTPCR方法檢沏UBcl2$NBaxmRNA表達的變化。結(jié)果1ACA對MCF7細胞的增殖抑制作用ACA對MCF7細胞有顯著的增殖抑制作用，10pmol／L組、50gmol／L組、100gmol／L組、150pmol／L組、2009mol／L組，細胞生長抑制率分別為1270％、1327％、2682％、6621％、8327％，呈明顯的劑量依賴性，相關(guān)系數(shù)嚴0938，P0001。各藥物組與對

4、照組A值的差異均有統(tǒng)計學(xué)意義，P0001。其24h的IC5D為(10857585)gmol／L。2ACA誘導(dǎo)MCF7細胞凋亡的作用21ACA作用后MCF7細胞形態(tài)學(xué)變化ACA作用后，與對照組相比，ACA終濃度為50pmol／L時，MCF7細胞形態(tài)未出現(xiàn)明顯的變化；而終濃度為100、150gmol／L時，MCF7細胞出現(xiàn)凋亡的形態(tài)學(xué)變化：細胞皺縮，表面粗糙，胞質(zhì)濃集、核濃縮致密。細胞與相鄰細胞分離，向上卷起，最終呈懸浮狀態(tài)，且隨藥物濃度增