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1、目的:研究熱休克蛋白70(HSP70)對(duì)MCF-7人乳腺癌細(xì)胞增殖的影響,并對(duì)其機(jī)制進(jìn)行初步探討。 方法:將MCF-7細(xì)胞經(jīng)不同濃度的Hsp70處理3天,作細(xì)胞計(jì)數(shù)及采用MTT法檢測(cè)MCF-7細(xì)胞活性情況;RT-PCR法檢測(cè)經(jīng)HSP70處理3天后,MCF-7細(xì)胞在TLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中相關(guān)基因cyclinD1a、cyclinD1b的表達(dá)水平;培養(yǎng)3天后MCF-7細(xì)胞,快速加人HSP70,分別在作用0分鐘、5分鐘、15分鐘、30分鐘
2、、60分鐘后采用 Western Blot檢測(cè)TLR信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程中相關(guān)信號(hào)分子磷酸化ERK1/2,磷酸化I-κB的水平情況。 結(jié)果:細(xì)胞計(jì)數(shù)、MTT結(jié)果顯示,加Hsp70組細(xì)胞數(shù)與細(xì)胞活性均明顯增加,MCF-7細(xì)胞增殖明顯;經(jīng)Hsp70處理3天后的MCF-7細(xì)胞,采用RT-PCR方法檢測(cè)cyclinD1a、cyclinD1b的表達(dá),結(jié)果顯示,cyclinD1a明顯表達(dá)增加,而cyclinD1b沒有擴(kuò)增出任何片段;采用 West
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