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文檔簡介
1、目的:研究人脂聯(lián)素重組蛋白(Acrp30)對人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的誘導(dǎo)凋亡作用及其可能機(jī)制,為Acrp30的臨床應(yīng)用提供實(shí)驗(yàn)和理論依據(jù)。
方法:應(yīng)用MTT法檢測Acrp30對MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株的抗增殖作用及細(xì)胞毒活性;通過倒置顯微鏡、吖碇橙(AO)/溴化乙啶(EB)熒光染色、Annexin V/PI雙染法觀察腫瘤細(xì)胞的形態(tài)學(xué)改變;應(yīng)用流式細(xì)胞儀(FCM)檢測細(xì)胞凋亡率的變化;應(yīng)用熒光分光光度計法檢測用藥前后caspas
2、e-3的含量變化,探討Acrp30對凋亡通路的影響。
結(jié)果:(1)用MTT法檢測結(jié)果表明,Acrp30在體外對MCF-7人乳腺癌細(xì)胞株增殖有明顯的抑制作用,實(shí)驗(yàn)組與對照組相比其生長抑制率有顯著差異(P<0.01),而且這種抑制作用呈現(xiàn)濃度依賴性;(2)倒置顯微鏡觀察表明,實(shí)驗(yàn)組可見胞核固縮、碎裂、凋亡小體形成等凋亡形態(tài)學(xué)變化;(3)經(jīng)AO/EB熒光染色、Annexin V/PI雙染法觀察結(jié)果表明,實(shí)驗(yàn)組出現(xiàn)凋亡細(xì)胞;(4)流式
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