1、目的:臨床上各種原因所致的肢體離斷十分常見(jiàn),隨著顯微外科技術(shù)的發(fā)展,使斷肢再植手術(shù)的成功率不斷提高,但是如何延長(zhǎng)離斷肢體的保存時(shí)間,預(yù)防缺血再灌注損傷(IR),更好的恢復(fù)再植后的肢體功能,目前仍處于探索階段。減輕斷肢再植術(shù)后繼發(fā)的再灌注損傷,特別是對(duì)骨骼肌的損傷直接關(guān)系到再植后肢體的功能。
　　 缺血組織恢復(fù)血供后組織損傷進(jìn)一步加重的現(xiàn)象即缺血再灌注損傷,其發(fā)生機(jī)制較為復(fù)雜,但自由基在這一過(guò)程中具有重要作用。依達(dá)拉奉是日本厚生省

2、于2001年批準(zhǔn)上市的新型強(qiáng)效自由基清除劑,本實(shí)驗(yàn)通過(guò)改進(jìn)兔后肢缺血再灌注模型,增加樣本含量及觀察指標(biāo),觀察依達(dá)拉奉對(duì)斷肢再植術(shù)后骨骼肌發(fā)生缺血再灌注損傷的保護(hù)作用。
　　 方法:
　　 選用健康SD兔18只制作斷肢再植術(shù)后模型(均由河北醫(yī)科大學(xué)動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中心提供),根據(jù)干預(yù)方法的不同將18只SD兔隨機(jī)分為3組,每組6只,為空白對(duì)照組、缺血再灌注組(IR組)、依達(dá)拉奉保護(hù)組(依達(dá)拉奉組)。用17％戊巴比妥鈉(40～60mg

3、/kg)耳緣靜脈麻醉。麻醉平穩(wěn)后(角膜反射消失),沿左股動(dòng)靜脈血管束切開(kāi)皮膚,在放大10倍手術(shù)顯微鏡下從左腹股溝至膝關(guān)節(jié)游離出股動(dòng)脈、股靜脈,結(jié)扎除腹壁淺動(dòng)、靜脈以外的所有分支。將離斷水平以遠(yuǎn)的肢體中殘存的血液自腹壁淺靜脈放出,完全切斷除股動(dòng)脈、股靜脈以外的所有結(jié)構(gòu)(包括股骨干),縫扎止血。再用無(wú)創(chuàng)傷血管夾在腹壁淺動(dòng)脈遠(yuǎn)、近端夾住股動(dòng)脈建立大鼠左后肢斷肢模型。將暴露的組織用37.3℃溫林格氏液紗布覆蓋?？瞻讓?duì)照組單純游離股動(dòng)靜脈后,不再

4、給與其它處理。IR組SD兔左后肢缺血2.5小時(shí)后,用粗細(xì)相當(dāng)?shù)目耸厢槍⒐晒歉伤鑳?nèi)固定,離斷肌肉進(jìn)行縫合(此過(guò)程于30min完成),之后松開(kāi)血管夾恢復(fù)肢體血供。依達(dá)拉奉組SD兔左后肢缺血2.5小時(shí)后,重復(fù)上述再植過(guò)程,松開(kāi)股動(dòng)脈遠(yuǎn)端血管夾,自腹壁淺動(dòng)脈用靜脈輸液泵以50ml/h的速度灌注,待清亮的灌注液自腹壁淺靜脈流出后,松開(kāi)股動(dòng)脈近端血管夾恢復(fù)肢體血供。于再灌注后2小時(shí)、4小時(shí)、8小時(shí)、12小時(shí)取材。分別測(cè)定三組骨骼肌超氧化物歧化酶(S

5、OD)、丙二醛(MDA)、髓過(guò)氧化物酶(MPO)、Na+-K+-ATP酶、Ca2+-ATP酶,濕重/干重比值(W/D)等指標(biāo)的變化,以及觀察骨骼肌組織學(xué)的結(jié)構(gòu)變化。
　　 結(jié)果:
　　 光鏡結(jié)果顯示缺血再灌注組的骨骼肌纖維隨著時(shí)間的延長(zhǎng)肌纖維水腫程度逐漸加重,肌纖維壞死后斷裂的數(shù)量逐漸增多,排列逐漸紊亂,血管周?chē)仔约?xì)胞浸潤(rùn)數(shù)量逐漸增多;依達(dá)拉奉組肌纖維基本變化趨勢(shì)同對(duì)照組,但同時(shí)間橫向比較,組織的損傷程度要好于對(duì)照組;