1、目的：探討格爾德霉素對缺糖缺氧誘導的原代皮質(zhì)神經(jīng)元Necroptosis是否有保護作用，并深入研究其作用機制是否與RIP1存在相關性。
　　 方法：SD大鼠原代皮質(zhì)神經(jīng)元細胞培養(yǎng)14天，zVAD-fmk預處理30min，缺糖缺氧2小時，復灌不同時間觀察RIP1蛋白量變化并選擇表達量高峰時間點為復灌時間；不同濃度的格爾德霉素(GA)預作用不同的時間后，zVAD-fmk預作用30min阻斷Caspase依賴的凋亡途徑，缺糖缺氧(OG

2、D)2小時復灌8小時，通過westem blot、免疫熒光半定量、定性檢測RIP1蛋白量變化，LDH測定細胞受損程度；GA不同濃度以及預作用不同時間，測定LDH及相應的RIP1蛋白水平的變化；通過western blot觀察GA預作用后HSP90蛋白水平的變化；隨后實驗組分為OGD、OGD+zVAD以及OGD+zVAD+GA組，免疫沉淀RIP1，檢測HSP90及RIP1蛋白水平變化，并結合免疫熒光定性觀察；應用GA類似物Geldampi

3、cin(GE)，觀察其對RIP1、HSP90表達水平是否有影響；通過RT-PCR觀察GA預作用后RIP1基因表達情況變化。
　　 結果：隨著缺糖缺氧后復灌時間的延長，RIP1蛋白表達量逐漸增加，8小時達到最高水平，與LDH檢測的細胞受損程度相對應（P＜0.05）；隨著GA濃度的增高及預作用時間的延長，RIP1蛋白水平、LDH逐漸降低，當GA濃度大于1.0μmol/L，預作用時間超過8h,LDH水平逐漸升高(P＜0.05);GA可

4、以引起HSP90蛋白量降低，免疫沉淀結果顯示隨著GA的作用可以使RIP1及與之結合的HSP90蛋白水平均降低，而GE則對兩者均無影響；RT-PCR檢測RIP1基因水平，與DMSO組對比，在GA濃度為0.1μmol/L和2.0μmol/L時基因水平無明顯變化（P＜0.05）。
　　 結論：RIP1和HSP90以復合物的形式存在于胞質(zhì)中并介導Necroptosis的發(fā)生；GA對細胞RIP1基因的表達沒有影響，而是通過HSP90這一靶