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文檔簡介
1、目的:研究抑肽酶對凝血酶誘導的人臍靜脈內皮細胞(HUVECs)IL-8表達和核因子κB(NF-κB)活性的影響。 方法:將培養(yǎng)的HUVECs分為空白對照組、凝血酶組、以及800KIU/ml(半量)和1600KIU/ml(全量)抑肽酶組預處理1h,然后以凝血酶(4U/ml)誘導刺激作用。ELISA測定細胞培養(yǎng)上清液中IL-8含量;熒光實時定量PCR檢測IL-8mRNA表達,擴增產物進行熔解曲線圖和瓊脂糖電泳分析;采用激光共聚焦顯微
2、鏡觀察NF-κBp65在細胞胞質和胞核的分布情況。 結果:⑴凝血酶明顯刺激HUVECs分泌IL-8和IL-8mRNA表達,細胞中游離的NF-κB增加并促進其核轉位(P<0.01,P<0.01)。 ⑵半量和全量抑肽酶均能減少凝血酶誘導HUVECs IL-8的分泌和IL-8 mRNA的表達(P<0.01,P<0.01),且對細胞內游離的NF-κB產生和核轉位具有明顯抑制作用(P<0.01,P<0.01),兩抑肽酶組間的抑制作
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