1、目的： 評(píng)價(jià)基于Luminex XMAP系統(tǒng)的液相基因芯片技術(shù)的檢測(cè)靈敏度和特異度及其在女性生殖道人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測(cè)中的臨床價(jià)值，初步調(diào)查山東地區(qū)女性生殖道HPV感染情況及常見HPV基因型。 方法： 1．Luminex XMAP液相基因芯片在人乳頭狀瘤病毒(HPV)DNA檢測(cè)中的特異度、靈敏度驗(yàn)證根據(jù)GeraeBank公布的最新的HPV基因組序列，定量配制標(biāo)準(zhǔn)品質(zhì)粒。在確定優(yōu)化的檢測(cè)條件下，應(yīng)用Lu

2、minex XMAP液相基因芯片各型探針對(duì)一系列不同稀釋度標(biāo)準(zhǔn)品(5拷貝/5ul，10拷貝/5ul，20拷貝/5ul，50拷貝/5ul)進(jìn)行6次重復(fù)檢測(cè)以確定其檢測(cè)靈敏性；對(duì)正常人基因組標(biāo)準(zhǔn)品的檢測(cè)以確定其檢測(cè)特異性。 2．Luminex XMAP液相基因芯片在女性生殖道人乳頭狀瘤病毒(HPV)感染檢測(cè)中的臨床價(jià)值評(píng)價(jià)取福爾馬林固定石蠟包埋宮頸組織標(biāo)本231例和正常宮頸脫落細(xì)胞33例，采用26種基因型液體芯片技術(shù)和雜交捕獲(HC

3、)Ⅱ?qū)λ袠?biāo)本進(jìn)行HPV DNA檢測(cè)，比較兩種方法HPV檢測(cè)結(jié)果的符合情況，對(duì)所有不一致標(biāo)本及HPV單一型感染標(biāo)本進(jìn)行基因測(cè)序以鑒定液體芯片分型準(zhǔn)確性。 3．應(yīng)用Luminex XMAP液相基因芯片技術(shù)篩查山東地區(qū)高危人群人乳頭瘤狀病毒基因型取婦科門診就診者宮頸脫落細(xì)胞2925例，采用液相芯片技術(shù)進(jìn)行HPV基因型檢測(cè)。639例患者同時(shí)做病理診斷，按組織病理學(xué)分為細(xì)胞學(xué)正常組、炎癥組、宮頸上皮內(nèi)瘤變(C工N)I組、CIN Ⅰ-Ⅱ組

4、、CIN II組、CIN Ⅲ組和宮頸癌組。通過HPV-DNA亞型分布結(jié)合病理診斷，分析山東地區(qū)HPV感染基因型與宮頸病變程度的關(guān)系。 結(jié)果： 1．對(duì)于濃度在10拷貝/5ul以及以上的濃度的陽性參比品檢測(cè)結(jié)果均為陽性，對(duì)于濃度為5拷貝/5ul的陽性參比品檢測(cè)結(jié)果顯示，只有HPV16和HPV18均為陽性，但對(duì)于其它24型的陽性參比品的6次平行檢測(cè)至少有一次顯示為陰性，因此液相芯片檢測(cè)HPV DNA的下限為10拷貝/5ul。

5、Luminex XMAP液相基因芯片對(duì)正?；蚪M參比品檢測(cè)結(jié)果為陰性，特異度和靈敏度均較高。 2．應(yīng)用液相基因芯片技術(shù)和雜交捕獲(HC)Ⅱ?qū)?biāo)本進(jìn)行HPV DNA檢測(cè)，兩種方法檢測(cè)結(jié)果一致性極好(Kappa=0.8889)，正常組、CINⅡ組、CIN Ⅲ組和宮頸癌組Kappa．值依次為1、0.8372、0.6411和0.6540。所有液相芯片檢出的單一型經(jīng)基因測(cè)序驗(yàn)證準(zhǔn)確率為99.00﹪。 3．HPV總感染率36.0﹪(

6、1，054/2，925)，26種基因型檢出23種，按感染率從高到低依次為：HPV-16(26.75﹪)，HPV-52(25.75﹪)，HPV-58(10.47﹪)，HPV-18(8.87﹪)和HPV-11(6.94﹪)等。其中高危型感染占87.32﹪，低危型13.68﹪；單一型感染698例(66.22﹪)，多重感染356例(33.78﹪)，低危型11、6多與高危型多重感染。1054例HPV陽性患者中，261例(24.8﹪)為21-25歲

7、女性，隨年齡增大陽性例數(shù)減少，52例(4.9﹪)為51-67歲女性。各病理組HPV陽性率及多重感染率依次為：正常組23.37﹪、4.89﹪，炎癥組33.08﹪、7.14﹪，CIN I組54.54﹪、18.18﹪，CINI-Ⅱ組57.14﹪、28.57﹪，CIN Ⅱ組82.61﹪、41.30﹪，CIN Ⅲ組91.30﹪、43.37﹪，宮頸癌組100﹪、38.46﹪。以組織病理學(xué)為確診標(biāo)準(zhǔn)，液相芯片HPV DNA檢測(cè)CIN Ⅱ、Ⅲ和宮頸癌的

8、靈敏度、特異度、陽性預(yù)測(cè)值、陰性預(yù)測(cè)值依次為88.57﹪，76.63﹪，68.89﹪．92.16﹪。 結(jié)論： 1．在國內(nèi)率先將Luminex XMAP液相基因芯片技術(shù)引入女性生殖道人乳頭狀瘤病毒基因型檢測(cè)并對(duì)其檢測(cè)靈敏度、特異度和臨床價(jià)值作出評(píng)價(jià)。 2.首次對(duì)山東地區(qū)高危人群HPV感染情況及常見HPV基因型進(jìn)行檢測(cè)分析，為山東地區(qū)宮頸病變臨床診斷及疫苗研究等提供流行病學(xué)資料。 3．所選山東地區(qū)高危人群HP