1、研究目的:采用形態(tài)學(xué)、影像學(xué)和免疫學(xué)等方法多模態(tài)觀察高選擇性緩激肽B1受體拮抗劑R-954對(duì)乳腺癌皮下移植瘤的抑制作用,評(píng)價(jià)R-954對(duì)乳腺癌皮下移植瘤的抗腫瘤效果。
　　研究方法:通過小鼠皮下接種乳腺癌4T1細(xì)胞,構(gòu)建出小鼠乳腺癌皮下移植瘤模型。成瘤后隨機(jī)分為兩組,實(shí)驗(yàn)組(加藥組)皮下注射R-954(注射劑量2mg/kg),對(duì)照組皮下注射等劑量PBS緩沖液。連續(xù)15天,每天皮下注射R-954,同時(shí),每天觀察、測(cè)量移植瘤體積,并繪

2、制出兩組的腫瘤相對(duì)體積生長(zhǎng)曲線。R-954給藥后第16天,應(yīng)用MRI技術(shù)觀察腫瘤形態(tài)和大小,通過影像工作站后處理軟件(Extended MR Workspace)測(cè)量出每只小鼠每個(gè)橫斷面的腫瘤截面積,通過層面間腫瘤截面積數(shù)值的比較,獲取每只小鼠的腫瘤最大截面積,得出兩組腫瘤各自最大截面積。在完成小鼠MR成像檢查之后,處死小鼠,剝除移植瘤組織,通過電子天平稱取腫瘤重量(瘤重),得到實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的瘤重。瘤重稱量后,兩組分別取部分腫瘤組織進(jìn)

3、行RT-PCR(逆轉(zhuǎn)錄-聚合酶鏈反應(yīng))和免疫組化檢測(cè)。RT-PCR和免疫組化分別檢測(cè)移植瘤組織中血管內(nèi)皮生長(zhǎng)因子(VEGF)和CD34的表達(dá)水平。對(duì)以上各觀察指標(biāo)(兩組間)均進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)分析、處理。
　　研究結(jié)果:在連續(xù)15天皮下注射R-954后,實(shí)驗(yàn)組(加藥組)的腫瘤體積為(468.43294.987)mm3,對(duì)照組(等量PBS緩沖液)的腫瘤體積為(843.349/165.240)mm3。兩組的腫瘤體積具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.

4、01);處死小鼠,稱取瘤重,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的瘤重分別為(0.809/0.149)g和(1.466/0.225)g。兩組的瘤重具有明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。根據(jù)公式計(jì)算每組小鼠的腫瘤相對(duì)體積,并繪制出移植瘤生長(zhǎng)曲線。結(jié)果顯示:對(duì)照組腫瘤呈遞增生長(zhǎng),而實(shí)驗(yàn)組則生長(zhǎng)曲線較為低平。MR成像結(jié)果顯示連續(xù)15天給藥后,實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組腫瘤最大截面積存在明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。免疫組化結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組CD34抗體標(biāo)記的微血管密度值(MVD)

5、降低,與對(duì)照組相比明顯統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。RT-PCR結(jié)果顯示實(shí)驗(yàn)組VEGF mRNA表達(dá)水平降低,與對(duì)照組相比具有統(tǒng)計(jì)學(xué)差異(P<0.01)。
　　結(jié)論:新型高選擇性緩激肽B1受體拮抗劑R-954可抑制小鼠乳腺癌皮下移植瘤的生長(zhǎng),這種抑制作用可通過形態(tài)學(xué)(腫瘤體積和瘤重)、MR成像、免疫組化和RT-PCR等多模態(tài)方法進(jìn)行觀察和評(píng)價(jià)。R-954可降低乳腺癌組織中VEGF和CD34的表達(dá),對(duì)腫瘤的抑制作用可能是通過抑制腫瘤血