1、論文題目：旦￡叢y璧鎏望撻細胞透昱旦墜△：g昱撿體的羞昱麥達及對甚功能的髭響論文答辯日期：20150512溫州醫(yī)科大學碩士學位論文HCMV感染單核細胞誘導HLAG異構體的差異表達及對其功能的影響中文摘要目的：通過HCMV感染THP1單核細胞，研究其對HLAG異構體的差異表達、細胞岡子的分泌及細胞凋亡的影響，初步探討HCMV逃逸機體免疫應答的機制。方法：1HCMVADl69株感染THP1細胞，以THP1細胞作為對照。RT—PCR和West

2、ernBlot分別檢測HLA—G異構體mRNA和蛋白的表達；Flowcytometry檢測THP1細胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達；并采用ELISA檢測sHLA—G水平。2用RTPCR檢測HCMVADl69株感染THP1細胞IL6、TNF0【、IL—10和1FN吖mRNA的表達；ELISA檢測THP1細胞培養(yǎng)上清液中IL一6、TNFa、IL10和IFN一丫水平。3HCMVADl69株感染THP1細胞，利用DCFHDA法檢測TH

3、P一1細胞內活性氧，AnnexinVFITC／PI檢測THP一1細胞的凋亡率；并用WesternBlot檢測細胞凋亡相關蛋白Bcl2、Bax、Caspase3和p38MAPK。結果：1HCMV感染THP1細胞對HLAG異構體表達的影響HCMV感染THP1細胞1～5d后，HLAG異構體mRNA的表達以HLAG1、G3、G4和G5為主，感染后第1天HLAG1、一G3、G4和G5mRNA的表達明顯上調，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(尸D01

4、)。HLAG異構體蛋白的表達以HLA—G1和HLA—G5為主，感染后第1天，HLAG1和HLAG5蛋白的表達明顯上調，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(尸O01)。細胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達在感染后第1天明顯上調，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(PO01)，感染1天后細胞表面HLAG、ILT2和ILT4的表達下降；到感染后第4天，細胞表面HLAG的表達出現下調，與對照組比較，差異有統(tǒng)計學意義(P005)。sHLAG水平在感