1、血吸蟲(chóng)病是一種世界性的寄生蟲(chóng)傳染性疾病，對(duì)人類及家畜的健康安全具有極大的威脅，血吸蟲(chóng)疫苗的研制具有重大的經(jīng)濟(jì)價(jià)值及社會(huì)意義。轉(zhuǎn)基因植物疫苗是近年來(lái)發(fā)展起來(lái)的一種新技術(shù)，因其具有廉價(jià)、安全、有效等優(yōu)點(diǎn)，已成為當(dāng)今疫苗研究領(lǐng)域的熱點(diǎn)。紫花苜蓿是全世界應(yīng)用最廣泛的一種豆科牧草，具有較高的營(yíng)養(yǎng)價(jià)值和成熟的遺傳操作經(jīng)驗(yàn)。為了開(kāi)發(fā)血吸蟲(chóng)轉(zhuǎn)基因植物疫苗，本研究將Sj23轉(zhuǎn)化紫花苜蓿，并進(jìn)行DNA 及表達(dá)水平的檢測(cè)，取得的主要成果如下： 1.

2、擴(kuò)增日本血吸蟲(chóng)Sj23基因，經(jīng)TA 克隆和測(cè)序驗(yàn)證后，插入pCAMBIA1303的多克隆位點(diǎn)，構(gòu)建真核表達(dá)載體pCAMBIA1303-Sj23。 2. 以紫花苜蓿為材料，通過(guò)根癌農(nóng)桿菌(Agrobacterium tumefaciens)LBA4404 介導(dǎo)，將Sj23 對(duì)紫花苜蓿進(jìn)行遺傳轉(zhuǎn)化。采用2 mg/L 2,4-D＋0.5 mg/L KT的激素組合在MS 培養(yǎng)基上誘導(dǎo)愈傷組織，獲得96％的出愈率。再使用50 mg/L的H