1、有毒動(dòng)物毒液中含有豐富的具有高親和性以及多樣化的藥理學(xué)特性的神經(jīng)多肽毒素，它們的作用靶點(diǎn)主要為離子通道，使其開發(fā)成離子通道相關(guān)疾病治療藥物的一個(gè)重要資源。
　　Raventoxin-Ⅷ是從毒蜘蛛雷氏大疣蛛（Macrothele raveni）毒液中分離純化得到的一種由35個(gè)氨基酸殘基構(gòu)成、分子量為3965.202Da的多肽神經(jīng)毒素，含有6個(gè)半胱氨酸，依據(jù)理論分子量與實(shí)際分子量的差異推測(cè)其形成3對(duì)二硫鍵。通過Edman降解測(cè)序分析以

2、及結(jié)合雷氏大疣蛛毒腺的cDNA文庫信息得到raventoxin-Ⅷ氨基酸序列為TEESACGGFNARCPLHKCCPQYICKGWRTKRCLNP。通過膜片鉗檢測(cè)分析，發(fā)現(xiàn)raventoxin-Ⅷ對(duì)電壓門控鉀離子通道壓型Kv1.3具有較高親和性，其半有效抑制濃度(IC50)為36.3nM。作用選擇性分析表明1μM raventoxin-Ⅷ對(duì)Kv1.2、Kv2.1、Kv2.2、Kv3.1、Kv4.1、Kv4.2以及Kv4.3均沒有明顯的

3、抑制作用，而對(duì)Kv1.1、Kv1.4的IC50分別為2.49μM、1.41μM，比對(duì)Kv1.3的作用分別弱68倍，38倍。因此，raventoxin-Ⅷ抑制Kv1.3的作用具有高親和性以及高選擇性。依據(jù)raventoxin-Ⅷ與Kv1.3相互作用的快抑制動(dòng)力學(xué)以及對(duì)Kv1.3的激活曲線沒有明顯變化，推測(cè)raventoxin-Ⅷ屬于一種孔道堵塞型毒素。參考研究報(bào)道的Kv1.3孔道堵塞型毒素與Kv1.3的作用位點(diǎn)，對(duì)raventoxin-Ⅷ

4、與Kv1.3作用位點(diǎn)的研究首先定位于Kv1.3通道的S5-S6的linker區(qū)域。對(duì)比Kv1.1、Kv1.2、Kv1.3以及Kv1.4通道S5-S6 linker區(qū)域的氨基酸殘基差異，將Kv1.3通道S5-S6 linker區(qū)域的氨基酸殘基進(jìn)行了一系列的單點(diǎn)突變。經(jīng)過膜片鉗檢測(cè)，T394、Y400以及D402分別突變成丙氨酸(A)后，均使raventoxin-Ⅷ與Kv1.3作用的親和力降低60倍以上，D386替代為丙氨酸(A)后，毒素與

5、通道的作用降低了10.2倍，確定D386、T394、Y400及D402是raventoxin-Ⅷ與Kv1.3相互作用的關(guān)鍵位點(diǎn)。
　　少棘蜈蚣（Scolopendra subspinipes mutilans）又被稱為金頭蜈蚣，主要分布于亞洲東部以及澳大利亞。有毒動(dòng)物中，蜈蚣毒素的研究較少。從少棘蜈蚣毒液中分離純化得到一個(gè)具36個(gè)氨基酸殘基的多肽，命名為SsmTx-Ⅰ，由4個(gè)半胱氨酸形成兩對(duì)二硫鍵，其氨基酸序列為EESMLLS C

6、PDLS CPTGYTCDVLTKKCKRLSDELWDH, SsmTx-Ⅰ與已知多肽序列相比同源性較低(＜10％)。通過全細(xì)胞模式膜片鉗研究，發(fā)現(xiàn)SsmTx-Ⅰ能顯著抑制大鼠背根神經(jīng)節(jié)(DRG)上的電壓門控鉀離子通道(IC50=200nM)，對(duì)DRG上的電壓門控鈉離子通道沒有抑制作用。對(duì)表達(dá)在胚胎腎細(xì)胞（HEK293）中的九種電壓門控鉀離子通道亞型(Kv1.1、Kv1.3、Kv1.4、Kv2.1、Kv2.2、Kv3.1、Kv4.1、K