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![亞毒性劑量THP聯(lián)合TRAIL對前列腺癌細(xì)胞Du145體外生長影響的研究.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/1685896c-c20c-43ad-8d3a-f0a17a67a969/1685896c-c20c-43ad-8d3a-f0a17a67a9691.gif)
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文檔簡介
1、目的:通過研究亞細(xì)胞毒性劑量的化療藥物吡柔比星(THP)和腫瘤壞死因子相關(guān)的凋亡誘導(dǎo)配體(TRAIL)對前列腺癌體外生長的影響,探討兩藥單獨(dú)用藥和聯(lián)合用藥對人前列腺癌細(xì)胞Du145體外生長的影響,為TRAIL抗腫瘤作用的臨床應(yīng)用提供一個新的實(shí)驗(yàn)依據(jù),可能為激素難治性前列腺癌的治療尋求一種新的方案。
方法:常規(guī)方法培養(yǎng)前列腺癌細(xì)胞Du145,給予不同濃度的THP和TRAIL,分為單用THP組、單用TRAIL組、THP+TRAIL
2、聯(lián)合組、對照組和空白組。各組影響因素作用24小時后,采用MTT比色法測定不同藥物濃度作用后,各組細(xì)胞生長抑制率,同時選定THP的亞毒性劑量。倒置相差顯微鏡下觀察各組細(xì)胞形態(tài)學(xué)變化以及生長情況,再采用Annexin V/PI雙染色法進(jìn)行流式細(xì)胞術(shù)檢測前列腺癌細(xì)胞Du145的凋亡率。各組藥物刺激后,提取Du145細(xì)胞胞漿蛋白,采用Western-Blot法進(jìn)行蛋白印跡顯影,檢測各組細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3的表達(dá)。
結(jié)果:<
3、br> 1、THP和TRAIL對人前列腺癌細(xì)胞株Du145均有抑制生長作用,THP的抑制作用較強(qiáng),Du145細(xì)胞對其相對敏感。TRAIL雖有抑制作用,但Du145細(xì)胞對TRAIL并不敏感。
2、亞毒性劑量的THP聯(lián)合不同藥物濃度的TRAIL對Du145細(xì)胞有較強(qiáng)的抑制作用,并且呈現(xiàn)出較高的協(xié)同作用,其協(xié)同因子均大于1,最大協(xié)同因子CF=1.38807。
3、倒置相差顯微鏡下觀察不同藥物濃度刺激下,細(xì)胞出現(xiàn)不同程度的
4、死亡。見附圖。
4、流式細(xì)胞術(shù)檢測發(fā)現(xiàn)藥物刺激后出現(xiàn)不同程度的凋亡,THP+TRAIL聯(lián)合組凋亡率最高。同時證明了協(xié)同殺傷作用是通過誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡實(shí)現(xiàn)的。
5、采用Western-Blot法檢測藥物刺激后Du145細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白的表達(dá),顯影后可見THP+TRAIL聯(lián)合組刺激后的細(xì)胞胞漿蛋白內(nèi)caspase-3蛋白明顯高于單用藥物組和對照組。見附圖。
結(jié)論:THP和TRAIL對人前列腺癌細(xì)
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