1、背景和目的：
　　 PI3K-Akt 信號通路在細胞糖酵解中有著重要作用，Akt 也是許多腫瘤發(fā)生發(fā)展的主要癌基因。本文探索Akt 通路在前列腺癌細胞系DU145和PC3細胞糖酵解中的作用及其可能的機制。
　　 方法：
　　 不同濃度的LY294002和氯化鈷單獨或聯(lián)合處理DU145和PC3細胞。用鏡下細胞計數(shù)法檢測細胞的生長增殖；用化學發(fā)光法檢測細胞培養(yǎng)液中的葡萄糖消耗和乳酸生成；用蛋白印跡法檢測磷酸化Akt

2、和HIF-1α的蛋白表達；用實時定量RT-PCR 法檢測Glut1、HK2、PFK1/2、ALDOA、PGK1、PKM2、LDH1、PDHb、CS、IDH3a、G6PD 和ACLY 的mRNA 表達。
　　 結(jié)果：
　　 ①在有Akt 活性的PC3 細胞，LY294002 能抑制Akt 活性和細胞的生長增殖；LY294002 也減少細胞的葡萄糖消耗和乳酸生成，分別降低29.8~33.4％和50.9~53.6％；基礎(chǔ)水平的

3、葡萄糖消耗和乳酸生成較高，分別為29.67 和30.19μmol/106cell。在無Akt 活性的DU145 細胞，LY294002 對細胞葡萄糖消耗和乳酸生成的抑制率較低，分別降低10.7~17.3％和35.4~36.5％；細胞基礎(chǔ)水平的葡萄糖消耗和乳酸生成較低，分別為18.68 和19.90μmol/106cell。LY294002 還同時降低PC3 和DU145 細胞HIF-1α的蛋白表達。
　　 ②氯化鈷誘導(dǎo)PC3 和

4、DU145 細胞HIF-1α的蛋白表達，同時也能回復(fù)LY294002 引起的HIF-1α表達下降。在PC3 細胞，氯化鈷增加細胞的葡萄糖消耗和乳酸生成，分別升高15％和32％；氯化鈷部分回復(fù)LY294002 引起的細胞葡萄糖消耗和乳酸生成減少。在DU145 細胞，氯化鈷使細胞的葡萄糖消耗升高12％，對乳酸生成無影響；氯化鈷誘不能回復(fù)細胞的葡萄糖消耗和乳酸生成。
　　 ③在PC3 細胞，LY294002 降低Glut1、HK2、P

5、FK2、ALDOA、PGK1、PKM2 和LDH1 的mRNA 表達；氯化鈷升高Glut1、HK2、PFK2、PGK1、LDH1 和G6PD 的mRNA 表達；氯化鈷還能回復(fù)LY294002 引起的ALDOA和LDH1 的mRNA 表達減少。在DU145 細胞，LY294002 降低Glut1、HK2、PFK1、ALDOA、PGK1、PKM2 和LDH1 的mRNA 表達；氯化鈷升高HK2、PFK2、PGK1 和IDH3a 的mRNA