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文檔簡介
1、酪蛋白巨肽(Casein Glycomacropeptide,CGMP)是一種來源于哺乳動物k-酪蛋白,具有64個氨基酸殘基(106-109)的糖肽。它是在干酪生產過程中,凝乳酶(或胃蛋白酶)水解κ-casein中Phe105-Met106的肽鍵所得到。CGMP具有不同的種類,主要是由于其不同的糖基化和磷酸化結構。CGMP已知具有多種生物活性,例如結合霍亂毒素和大腸桿菌毒素;抑制細菌和病毒的粘附作用;抑制胃液分泌;促進雙歧桿菌增殖;調節(jié)
2、免疫系統(tǒng)等。本文研究了胃蛋白酶水解酪蛋白制備CGMP的工藝條件,并發(fā)現(xiàn)了粗品CGMP對口腔致病菌-變形鏈球菌具有抑制作用。
在本文中,CGMP是通過胃蛋白酶酶解牛乳酪蛋白產生的。實驗研究了水解時間、溫度、pH、酶與底物比這四個因素對CGMP生成量的影響。通過正交實驗,得到最佳水解條件是:水解時間為40min,pH1.8,溫度為45℃,酶與底物比([E]/[S])為134.4U/g。
通過間苯二酚-鹽酸法,以C
3、GMP標準品為對照,進行水解產物中CGMP的檢測,實驗結果表明:水解產物與CGMP標準品所顯顏色相同。進而證明了該水解產物中確有CGMP存在。隨后,實驗通過間苯二酚-鹽酸法,測定水解產物中唾液酸含量,并對照CGMP標準曲線,推算出水解產物中CGMP含量為30.74%。實驗采用Tricine-SDS-PAGE電泳,對水解產物中的CGMP進行了鑒定,并考察其分子量的分布。實驗結果表明水解產物中CGMP分子量約為7.0kDa和15kDa不等。
4、
采用濾紙片擴散法,研究粗品CGMP抑制變形鏈球菌生長的特性。實驗發(fā)現(xiàn):含有粗品CGMP的濾紙片周圍抑菌圈清晰透明,證明粗品CGMP對變形鏈球菌具有明顯的抑制作用。采用96-孔板法對粗品CGMP對變心鏈球菌的抑制作用進行定量研究。實驗結果顯示:粗品CGMP對變形鏈球菌的最小抑菌濃度為24mg/mL,此外當粗品CGMP濃度為12mg/mL、6mg/mL、3mg/mL時,粗品CGMP對變形鏈球菌的抑制率也較高,分別為:88%、
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