1、目的:金屬納米顆粒具有光熱轉(zhuǎn)換效應(yīng),可將吸收的光能量轉(zhuǎn)化為熱能、進(jìn)而產(chǎn)生高溫殺滅腫瘤細(xì)胞?；诮鸺{米顆粒的光熱轉(zhuǎn)換特性,觀察經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接的免疫金納米籠對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7靶向光熱殺傷效應(yīng),通過(guò)體外實(shí)驗(yàn)探討其對(duì)腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及其毒性大小,有望為后期動(dòng)物實(shí)驗(yàn)及臨床應(yīng)用提供理論基礎(chǔ)。
　　方法:金納米籠經(jīng)Anti-CK19抗體鏈接后制成探針使其具有生物靶向性,通過(guò)免疫組化方法檢測(cè)MCF-7細(xì)胞膜表面是否表達(dá)CK1

2、9抗原。將細(xì)胞分為兩組;實(shí)驗(yàn)組(A組):將金納米籠-抗體探針鏈接細(xì)胞后,用功率密度為1.5 W/cm2、波長(zhǎng)為808 nm的激光照射30 min;對(duì)照組BⅠ組:使用相同光照強(qiáng)度和波長(zhǎng)的激光單純光照30 min而不加入金納米籠-抗體探針;對(duì)照組BⅡ組為單純加入金納米籠-抗體探針而無(wú)光照;對(duì)照組BⅢ組:無(wú)金納米籠無(wú)光照。觀察實(shí)驗(yàn)組及對(duì)照組溫度隨時(shí)間變化曲線,通過(guò)熒光終止劑染色實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組細(xì)胞以及運(yùn)用流式細(xì)胞儀檢測(cè)免疫金納米籠對(duì)人乳腺癌細(xì)胞

3、 MCF-7的光熱殺傷作用。通過(guò)四甲基偶氮唑藍(lán)(MTT)比色法觀察不同濃度的金納米籠-抗體探針對(duì)MCF-7細(xì)胞的毒性大小。
　　結(jié)果:通過(guò)細(xì)胞免疫組化證實(shí)MCF-7細(xì)胞膜表達(dá)CK19抗原。A組溫度升高明顯,光照5~6 min后便可從室溫22℃上升至48℃,后達(dá)到平衡;BⅠ組溫度無(wú)明顯變化,上升至35℃左右則不再變化;BⅡ與BⅢ組溫度無(wú)變化。通過(guò)熒光終止劑染色細(xì)胞以及流式細(xì)胞儀檢測(cè)實(shí)驗(yàn)組和對(duì)照組的細(xì)胞,發(fā)現(xiàn)實(shí)驗(yàn)組細(xì)胞大量凋亡,而對(duì)照

4、組細(xì)胞活性基本未受影響(P<0.05)。MMT法結(jié)果顯示免疫金納米籠對(duì)MCF-7細(xì)胞毒性較小(P<0.05)。
　　結(jié)論:(1)通過(guò)免疫組化染色證實(shí),CK19抗原主要存在人乳腺癌細(xì)胞系 MCF-7細(xì)胞膜表面;(2)免疫金納米籠對(duì)人乳腺癌細(xì)胞MCF-7具有靶向殺傷作用,且用功率密度為1.5 W/cm2、波長(zhǎng)為808 nm的激光照射30 min后細(xì)胞死亡率可達(dá)87.9％;(3)濃度為10 mg/ml的免疫金納米籠對(duì)MCF-7細(xì)胞毒性影