軟脂酸對胰島細胞凋亡及機制的研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:探討不同濃度軟脂酸對胰島細胞凋亡及胰島素釋放的影響  方法:膠原酶P消化,F(xiàn)icoll400純化的成年SD大鼠胰島細胞經(jīng)RPMI1640培養(yǎng)7天后,鋪成單層,用不同濃度軟脂酸(分別為0、0.125、0.25、0.5mmol/L)共同孵育48h,分別用含葡萄糖2.8mmol/L和28mmol/L的KRBB孵育1小時后用放免法測定胰島素含量。AO/EB染色觀察細胞形態(tài)變化,用Tunel法及流式細胞術(shù)計算胰島細胞凋亡率?! 〗Y(jié)果:在

2、低濃度(2.8mmol/L)葡萄糖刺激下,各濃度軟脂酸組的胰島素分泌量與對照組相比無顯著性差異(P>0.05)。高糖(28mmol/L)刺激下各處理組的胰島素分泌較對照組明顯減少(P<0.05)。各種濃度軟脂酸均能促進胰島細胞凋亡。  結(jié)論:軟脂酸對基礎(chǔ)狀態(tài)下(2.8mmol/L葡萄糖)的胰島素分泌無明顯影響,但可抑制高糖狀態(tài)下(28mmol/L葡萄糖)的胰島素分泌,且可誘導(dǎo)胰島細胞凋亡。  目的:探討軟脂酸介導(dǎo)的胰島細胞凋亡過程中

3、細胞內(nèi)脂質(zhì)堆積、NO生成及Bax蛋白、Bcl-2蛋白的表達?! 》椒?膠原酶P消化,F(xiàn)icoll400純化的成年SD大鼠胰島細胞經(jīng)RPMI1640培養(yǎng)7天后,鋪成單層,用不同濃度軟脂酸(分別為0、0.125、0.25、0.5mmol/L)共同孵育48h,用油紅染色觀察細胞內(nèi)脂質(zhì)堆積。用硝酸還原酶法分別測定培養(yǎng)0小時、24小時、48小時后培養(yǎng)液上清NO的濃度,應(yīng)用免疫組化技術(shù)、免疫熒光技術(shù)及流式細胞儀檢測胰島細胞Bcl-2及Bax蛋白的

4、表達。  結(jié)果:油紅染色見軟脂酸處理組胰島細胞內(nèi)均有脂質(zhì)堆積,尤以高濃度組明顯;不同濃度軟脂酸處理均能使胰島細胞合成NO增加,24小時,48小時與A組比較,差異有顯著性(P<0.05);免疫組化法顯示:對照組Bax蛋白表達陰性,Bcl-2蛋白表達陽性,0.125mmol/L軟脂酸處理組,Bax蛋白表達弱陽性,Bcl-2蛋白表達陽性,0.25mmol/L及0.5mmol/L軟脂酸處理組Bax蛋白表達陽性,Bcl-2蛋白陰性。FITC間接

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