1、微孢子蟲是一類專性細胞內寄生的病原微生物，它能寄生于包括人在內幾乎所有的動物體內。家蠶微孢子蟲能感染家蠶引起家蠶微粒子病，是蠶業(yè)生產上一種重點控制的蠶病。家蠶微孢子蟲蛋白質組學研究以總蛋白為研究對象，主要采用雙向電泳技術、質譜技術以及生物信息學技術，獲得家蠶微孢子蟲蛋白質雙向電泳參考圖，通過質譜分析，鑒定蛋白質，以期找到與微孢子蟲侵染、增殖及代謝等重妻生理過程相關的蛋白質，為家蠶微孢子蟲的基礎研究積累更多的知識。 1．成熟家蠶微

2、孢子蟲總蛋白提取方法的建立。提取家蠶微孢子蟲蛋白質的方法主要有化學與物理的方法，化學方法是利用0.1mol/LK<,2>CO<,3>溶液在27℃條件下刺激微孢子蟲彈出極管，釋放出的孢原質破裂，然后獲取蛋白質，此方法簡單且提取的蛋白質含量較豐富，但樣品中含有大量的鹽離子。物理方法主要是采用液氮反復凍融結合研磨，破碎幾丁質外壁，用蛋白質抽提液抽提，從而得到蛋白質，此方法較煩瑣，但得到的蛋白質含量豐富且樣品中鹽離子濃度極低，適用于雙向電泳，且

3、電泳效果較好。 2．家蠶微孢子蟲雙向電泳參考圖譜的建立。通過雙向電泳，我們得到一張比較完整的家蠶微孢子蟲蛋白質圖譜，通過Image master軟件分析，可識別的蛋白點有267個。多數蛋白質分子量集中在45KD以下，各pH段都有分布，小分子量蛋白質種類豐富，而大分子量的蛋白質含量較少，特別是堿性區(qū)域的大分子量蛋白質極少。 3．家蠶微孢子蟲本地蛋白質檢索數據庫的建立及蛋白質譜鑒定。根據家蠶微孢子蟲全基因組數據預測出的編碼序

4、列，利用GPMAW軟件，建立本地蛋白質數據庫。從雙向電泳圖譜共挖點295個(包括重復挖點)，通過MALDI-TOF-MS鑒定出的蛋白質點有80個，除去重復后的蛋白質點有50個，其中有功能信息的蛋白質有28個，hypothetical protein有9個，未知蛋白有13個。對有功能信息的蛋白質進行分析，發(fā)現其功能涉及到微孢子蟲的基本生理活動，包括蛋白質代謝、轉錄、轉座、細胞骨架、細胞修復、死亡、老化、細胞生長、胞內信號傳導、蛋白質合成等