1、浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文白藜蘆醇對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞的抑制作用及其機(jī)制研究姓名：白宇申請(qǐng)學(xué)位級(jí)別：博士專業(yè)：外科學(xué)（泌尿外）指導(dǎo)教師：謝立平200803012008年浙江大學(xué)醫(yī)學(xué)院博士學(xué)位論文CyclinD1和CDK4的表達(dá)，并增強(qiáng)了WAF一1／p21蛋白的表達(dá)。第二部分白藜蘆醇對(duì)人膀胱癌T24細(xì)胞凋亡的影響目的研究白藜蘆醇在體外對(duì)人膀胱癌細(xì)胞系T24細(xì)胞凋亡的誘導(dǎo)作用，并探討其誘導(dǎo)凋亡的相關(guān)分子機(jī)制。方法采用流式細(xì)胞儀(PI和all

2、IlexinV雙染法)檢測(cè)T24細(xì)胞凋亡的變化。采用West鋤blo劬唱方法檢測(cè)不同濃度白藜蘆醇(O，50，100，150和200“M)作用24小時(shí)后，T24細(xì)胞中P13眥、ⅨⅨ1／2和p38三條信號(hào)通路的改變，同時(shí)研究了Bcl2家族、casp硒e一3和caSpase9等蛋白在白藜蘆醇作用后表達(dá)的變化。結(jié)果1不同濃度白藜蘆醇(O，50，100，150和200“M)作用于T24細(xì)胞24小時(shí)后能明顯誘導(dǎo)細(xì)胞凋亡，凋亡的誘導(dǎo)作用呈顯著劑量依賴

3、性。、2光學(xué)顯微鏡顯示不同濃度白藜蘆醇(0，50，100，150和200pM)作用于T24細(xì)胞24小時(shí)后使細(xì)胞密度呈劑量依賴性降低，細(xì)胞形態(tài)改變也呈劑量依賴性，同時(shí)觀察到凋亡細(xì)胞所具有的形態(tài)學(xué)改變。3通過流式細(xì)胞儀(PI和鋤neXinV雙染法)檢測(cè)發(fā)現(xiàn)白藜蘆醇作用于T24細(xì)胞24小時(shí)后凋亡細(xì)胞數(shù)量呈劑量依賴性增加。白藜蘆醇(O200M)作用24小時(shí)后產(chǎn)生的早期凋亡細(xì)胞為40％141％；晚期凋亡細(xì)胞分別為26％367％，總的凋亡細(xì)胞為66

4、％475％。4白藜蘆醇(O一200pM)作用24小時(shí)后，隨著作用濃度的增加，T24細(xì)胞phosphoSer473Akt與phosphoERKl／2的表達(dá)逐漸降低，但tA虹與tERKl／2未見改變；phoSphop38表達(dá)逐漸增強(qiáng)，tp38表達(dá)未見改變，三種信號(hào)蛋白表達(dá)變化均呈顯著的濃度依賴性。5白藜蘆醇(0—200肛M)作用24小時(shí)后，隨著作用濃度的增加，T24細(xì)胞中Bcl2與BclXL的表達(dá)逐漸降低，而BaX表達(dá)逐漸增高，呈顯著的濃度