1、蘋果梨（Pingguoli）是薔薇科（Rosaceae）梨屬（Pyrus）植物，因其個大、耐寒、豐產、優(yōu)質，陽面著紅色，肉質酥脆多汁而備受消費者喜愛。本試驗通過RT-PCR技術對影響蘋果梨果實著色相關酶（PAL、CHS）基因全長進行了克隆，并且構建了 PAL基因的植物表達載體，以期為進一步探明蘋果梨果實著色的分子機理及研究其基因功能奠定了基礎。結果如下：
　　1、首次從蘋果梨中成功地克隆了PAL基因的全長cDNA序列，命名為PyP

2、AL。PyPAL cDNA全長2160bp，推測其編碼719個氨基酸，分子量（MV）為77.91KDa，等電點（PI）值為6.18。經同源性比較PyPAL與一些薔薇科植物序列高度同源。
　　2、生物信息學分析表明，PyPAL整條多肽鏈中親水氨基酸416個，疏水氨基酸295個，整條多肽鏈表現為親水性，定位于細胞質基質，且無轉運肽，不存在跨膜結構域。PyPAL蛋白二級結構預測顯示：α-螺旋(H)占50.49％，β-折疊（E）占2.36

3、%，無規(guī)卷曲（C）占47.15%。故PyPAL蛋白二級結構以α-螺旋和無規(guī)卷曲為主。
　　3、構建了含有PAL基因的植物表達載體PBI121-PyPAL，利用凍融轉化法轉化到根癌農桿菌LBA4404中。為將PyPAL轉化到模式植物或其他植物進而了解其功能奠定了基礎。
　　4、克隆得到的蘋果梨CHS基因的全長cDNA序列為1170bp，命名為PyCHS1，其中A+T含量為47.26%，C+G為52.74%，推測其編碼389個氨

4、基酸，分子量為42.5KDa，等電點為5.77。經同源性比較PyCHS1與一些薔薇科植物序列高度同源。
　　5、生物信息學分析表明，PyCHS1整條多肽鏈中親水氨基酸215個，疏水氨基酸166個，整條多肽鏈表現為親水性，定位于細胞質基質，且無轉運肽，不存在跨膜結構域。PyCHS1蛋白二級結構預測顯示：α-螺旋（H）和無規(guī)卷曲（C）各占44.22%和32.39%，而β-折疊（E）則達到23.39%。故PyCHS1蛋白二級結構以α-螺