1、一、研究目的：
　　本課題通過(guò)理論與實(shí)驗(yàn)研究，探討皂莢提取物對(duì)原發(fā)性肝癌是否具有明顯的改善和治療作用，同時(shí)研究皂莢提取物組、索拉菲尼組、空白組和模型組對(duì)大鼠肝癌的療效差別，從而探討皂莢提取物治療原發(fā)性肝癌的機(jī)制，為臨床正確合理使用皂莢治療原發(fā)性肝癌提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。
　　二、研究方法：
　　第一部分理論研究
　　1.皂莢及其提取物臨床上對(duì)治療原發(fā)性肝癌的效果非常突出，且不良反應(yīng)較少，與肝癌的治療和預(yù)后關(guān)系密切。

2、>　　2.肝癌內(nèi)的微血管密度可以作為一個(gè)新的生物學(xué)特征，它反應(yīng)了癌細(xì)胞的發(fā)展、浸潤(rùn)、轉(zhuǎn)移的程度，可以作為腫瘤轉(zhuǎn)移的預(yù)測(cè)因子和指標(biāo)。
　　第二部分實(shí)驗(yàn)研究
　　1.肝癌模型的建立
　　1.1大鼠腹水瘤的建立
　　將Walker-256細(xì)胞株先置于-80℃的冰柜里凍存，待用時(shí)將其從凍存管中取出，然后放到水浴當(dāng)中（37℃），待細(xì)胞株完全融化后，從凍存管取出。用吸管不停地吹打細(xì)胞懸液，然后轉(zhuǎn)移到離心管當(dāng)中（15ml）。緩

3、慢加入8ml PBS緩沖液，并輕輕晃動(dòng)離心管。然后以1000轉(zhuǎn)/分的速度離心離心管10min，清除上清，用PBS緩沖液清洗2次。隨后用PBS緩沖液4ml重懸細(xì)胞，在5只Wistar大鼠的腹腔內(nèi)分別注入1ml的細(xì)胞懸液。1個(gè)月后大鼠腹部會(huì)逐漸膨起，此時(shí)形成癌性腹水。
　　1.2種植用腹水瘤的制備
　　在傳代的Wistar大鼠體內(nèi)抽取癌性腹水5ml（基本呈淡紅色洗肉水樣），放于離心機(jī)內(nèi)進(jìn)行離心（以2000轉(zhuǎn)/分的速度離心2min

4、）。然后棄去上層清亮淡色液體，抽取下層粘稠的濃縮腹水1ml，作為備用。
　　1.3肝癌模型
　　首先對(duì)大鼠腹腔內(nèi)注射水合氯醛（按40μg/100g體重進(jìn)行配制）進(jìn)行麻醉，把大鼠以呈仰臥位固定于鼠板上，用0.5％活力碘消毒腹部，順著腹白線剪開并逐層分離腹部，大鼠的腹腔臟器會(huì)逐漸顯現(xiàn)，肝臟在上腹部膨出。把最外層肝葉作為實(shí)驗(yàn)標(biāo)本，將乘有癌性腹水的注射器以30度的傾斜角度刺入肝臟內(nèi)約0.5cm，輕輕推送癌性腹水約0.05ml。然后拔

5、出注射器針頭，用消毒棉簽按壓在注射點(diǎn)直到不出血為止。將肝臟重納入腹腔后，關(guān)閉腹腔。采用紅霉素軟膏擦拭消毒傷口。共制備50只大鼠肝癌模型，然后進(jìn)行一周的適應(yīng)性喂養(yǎng)，隨機(jī)分為5組。
　　2.實(shí)驗(yàn)分組及處理措施
　　實(shí)驗(yàn)前禁食2小時(shí)，先分別給各組大鼠稱量體重，然后根據(jù)人臨床用量（豬牙皂生藥量1.5g.60kg.d-1）、人與大鼠的等效劑量倍數(shù)，增加至6倍作為皂莢提取物低劑量組的實(shí)驗(yàn)用量，按1：2：4，將60只雄性大鼠隨機(jī)分為6組，

6、即：皂莢提取物低劑量(0.15g.kg.d-1)組、皂莢提取物中劑量(0.3g.kg.d-1)組、皂莢提取物高劑量(0.6g.kg.d-1)組、索拉非尼組:0.08g/kg/d（索拉非尼成人0.8g/d,按人與大鼠體表面積折算的等效劑量計(jì)算，0.8g×7／70=0.08g/kg/d）；空白對(duì)照(E)組：0.9%生理鹽水10 ml/kg/d對(duì)正常大鼠進(jìn)行灌胃；模型組：0.9%生理鹽水10 ml/kg/d對(duì)肝癌大鼠進(jìn)行灌胃。每天實(shí)行等時(shí)（1

7、4：30）等對(duì)各組大鼠進(jìn)行灌胃一次，每周連續(xù)灌胃6次，周日測(cè)大鼠體重，然后再根據(jù)體重調(diào)整劑量，各組連續(xù)給藥30天。
　　3.實(shí)驗(yàn)步驟
　　3.1 MVD實(shí)驗(yàn)步驟：解剖實(shí)驗(yàn)大鼠，取出肝臟組織,并以4%的甲醛溶液固定,修剪組織并沖洗后經(jīng)梯度酒精脫水，常規(guī)石蠟包埋切片(片厚6μm)、以鼠抗-CD34（1:50）為第一抗體，EnVision(rat)為第二抗體（均購(gòu)于Abcam公司，貨號(hào)：Ab185732）進(jìn)行免疫組織化學(xué)染色。根據(jù)

8、Weidner校正方法，先用低倍鏡（×10）在每一個(gè)標(biāo)本先下選取熱點(diǎn)（5個(gè)微血管數(shù)最多的區(qū)域），然后在每一個(gè)熱點(diǎn)中計(jì)算一個(gè)高倍鏡（×40）下的微血管數(shù)目，取其平均值為MVD值[3]。
　　3.2實(shí)驗(yàn)分為空白組、模型組、皂莢提取物低劑量組、皂莢提取物中劑量組、皂莢提取物高劑量組、索拉菲尼組6組。采用蛋白印跡法和實(shí)時(shí)熒光定量 PCR法分別檢測(cè)各組 VEGF、HIF-1α、PI3K、AKT、mTOR的表達(dá)。
　　3.3實(shí)驗(yàn)分為空白

9、組、模型組、皂莢提取物低劑量組、皂莢提取物中劑量組、皂莢提取物高劑量組、索拉菲尼組6組。分別進(jìn)行各組大鼠的肝臟病理切片的檢測(cè)和一般形態(tài)學(xué)的觀察。
　　4.統(tǒng)計(jì)學(xué)處理
　　應(yīng)用SPSS19.0統(tǒng)計(jì)學(xué)軟件對(duì)數(shù)據(jù)進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理。兩組間比較用t檢驗(yàn),三組間比較采用方差分析，觀察指標(biāo)采用x±s表示，P<0.05為差異有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義。
　　三、實(shí)驗(yàn)結(jié)果：
　　1.不同組別的肝癌組織中MVD的表達(dá)
　　實(shí)驗(yàn)結(jié)果顯示，各個(gè)組

10、別與空白組比較，MVD值均有明顯的增加（P＜0.01）；各個(gè)給藥組與模型組相比較，MVD值均有明顯的下降（P＜0.01）。此結(jié)果表明MVD在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予藥物治療后，大鼠肝癌組織趨于好轉(zhuǎn)，MVD也有所下降，提示MVD與肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后密切相關(guān)。同時(shí)各個(gè)給藥組之間 MVD的變化沒(méi)有明顯的差異（P>0.05），提示皂莢提取物與索拉菲尼均可防治原發(fā)性肝癌，且二者的效果差異不大。
　　2.蛋白印跡法檢測(cè)皂莢提取

11、物對(duì)肝癌大鼠 HIF-1α、VEGF、PI3K、AKT、mToR表達(dá)的影響
　　2.1不同組別對(duì)AKT分子表達(dá)的影響
　　其它各個(gè)組別分別與空白組和模型組比較，AKT的表達(dá)都有明顯的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.01）；皂莢提取物低劑量組和中劑量組AKT與索拉菲尼組比較、皂莢提取物中劑量組和皂莢提取物高劑量組AKT與皂莢提取物低劑量組比較有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；其他組之間沒(méi)有明顯的差異（P>0.05）。此結(jié)果表明AKT在肝癌大鼠

12、組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，AKT也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與AKT的表達(dá)密切相關(guān)。結(jié)論提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌中AKT表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　2.2不同組別對(duì)PI3K分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取

13、物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；空白組與皂莢提取物高劑量組比較、皂莢提取物低劑量組與模型組比較、皂莢提取物中劑量組與皂莢提取物低劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明PI3K在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，PI3K也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與PI3K的表達(dá)作用密切。此結(jié)論提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌PI3K表達(dá)的效果比較顯著

14、，且二者的效果差異不大。
　　2.3不同組別對(duì)mToR分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物各劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組mToR與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；模型組與皂莢提取物低劑量組的mToR比較、索拉菲尼組與皂莢提取物高劑量組比較、皂莢提取物中劑量組與低劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表

15、明mToR在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，mToR也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與mToR的表達(dá)密切相關(guān)。同時(shí)結(jié)論也提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌中mToR表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　2.4不同組別對(duì)HIF-1α分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物各劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組與

16、索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量和中劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；模型組與皂莢提取物低劑量組比較、索拉菲尼組與皂莢提取物中劑量組比較、空白組與索拉菲尼組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。
　　此結(jié)果表明HIF-1α在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，HIF-1α也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與HIF-1α的表達(dá)密切相關(guān)。同時(shí)此結(jié)論提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲

17、尼在降低原發(fā)性肝癌中HIF-1α表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　2.5不同組別對(duì)VEGF分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；模型組和皂莢提取物中劑量組與皂莢提取物低劑量組比較、索拉菲尼組與皂莢提取物中劑量組比較、索拉菲尼組和皂莢提取

18、物高劑量組與空白組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明VEGF在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治后，VEGF也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與VEGF的表達(dá)密切相關(guān)。同時(shí)此結(jié)論提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌中VEGF表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　3.PCR法檢測(cè)皂莢提取物對(duì)肝癌大鼠HIF-1α、VEGF、PI3K、AKT、mToR表達(dá)的影響

19、r>　　3.1不同組別對(duì)AKT分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；皂莢提取物高劑量組與空白組比較、模型組與皂莢提取物中劑量組比較、索拉菲尼組與皂莢提取物高劑量組比較、皂莢提取物中劑量組與低劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明AKT在肝癌大

20、鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，AKT也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與AKT的表達(dá)作用密切。同時(shí)此結(jié)論也提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌AKT表達(dá)的效果比較顯著，且二者治療原發(fā)性肝癌效果的差異不顯著。
　　3.2不同組別對(duì)PI3K分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索

21、拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；皂莢提取物高劑量組與空白組比較、模型組與皂莢提取物中劑量組比較、皂莢提取物中劑量組與皂莢提取物低劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜
　　0.05）。此結(jié)果表明PI3K在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，PI3K也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與PI3K的表達(dá)作用密切。此結(jié)論同時(shí)也提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在

22、降低原發(fā)性肝癌PI3K表達(dá)的效果比較顯著，可以更好地防治原發(fā)性肝癌，且二者的效果差異不大。
　　3.3不同組別對(duì)mToR分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；空白組與高劑量組比較、模型組與低劑量組比較、皂莢提取物中劑量組與皂莢提取物低劑量組比較均有

23、統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明mToR在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，mToR也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與mToR的表達(dá)作用密切。此結(jié)論同時(shí)也提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌mToR表達(dá)的效果比較顯著，可以更好地防治原發(fā)性肝癌，且二者的效果差異不大。
　　3.4不同組別對(duì)HIF-1α分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物高中低劑量組和模型組與空白組比較、

24、皂莢提取物中高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；空白組和中藥中劑量組與索拉菲尼組比較、中藥中劑量組與中藥低劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明HIF-1α在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，HIF-1α也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與HIF-1α的表達(dá)密切相關(guān)。此結(jié)論同時(shí)也提示

25、皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌中HIF-1α表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　3.5不同組別對(duì)VEGF分子表達(dá)的影響
　　皂莢提取物高中低劑量組和模型組與空白組比較、皂莢提取物高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和中劑量組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與低劑量組比較均有顯著性差異（P＜0.01）；空白組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物中劑量組與模型組比較、皂莢提取物高低劑量組與皂

26、莢提取物中劑量組比較均有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）。此結(jié)果表明VEGF在肝癌大鼠組織中明顯高于正常組；當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，VEGF也有不同程度下降，提示肝癌的生長(zhǎng)、浸潤(rùn)、預(yù)后與VEGF的表達(dá)密切相關(guān)。此結(jié)論同時(shí)也提示皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼在降低原發(fā)性肝癌中VEGF表達(dá)的效果比較顯著，且二者的效果差異不大。
　　4.大鼠肝臟病理切片和一般形態(tài)學(xué)觀察
　　4.1皂莢提取物及索拉菲尼各組對(duì)大鼠一般情況的影響

27、
　　空白組：大鼠行動(dòng)自如；體格健壯；反應(yīng)敏捷；呼吸平穩(wěn)；毛發(fā)整潔光亮；目光有神；飲食正常。
　　模型組：大鼠行動(dòng)不便，個(gè)別步履蹣跚；目光呆滯；體格瘦小；反應(yīng)明顯遲鈍，對(duì)周圍環(huán)境的刺激沒(méi)有響應(yīng)；呼吸微弱；口角流涎；肌肉僵硬或萎縮；毛發(fā)稀疏；飲食減少；身體蜷縮，抱成一團(tuán)。
　　低劑量組：大鼠行動(dòng)不便，步履蹣跚；體格瘦??；目光呆滯；反應(yīng)遲鈍，對(duì)周圍環(huán)境的刺激響應(yīng)不及時(shí)；呼吸微弱或急促；口角流涎；肌肉萎縮；毛發(fā)松散；飲食較少

28、；身體蜷縮，抱成一團(tuán)。
　　中劑量組：大鼠行動(dòng)好轉(zhuǎn)，步履偶爾蹣跚；目光呆滯有所好轉(zhuǎn)；反應(yīng)稍慢，對(duì)周圍環(huán)境的刺激響應(yīng)不及時(shí)；呼吸微弱或急促；口角流涎減輕；肌肉萎縮或僵硬；毛發(fā)稀疏；飲食增加。
　　高劑量組：大鼠行動(dòng)自如，和正常組沒(méi)有明顯區(qū)別；體格健壯；目光有神；反應(yīng)稍有遲鈍，對(duì)周圍環(huán)境的刺激基本能夠及時(shí)做出回應(yīng)；呼吸基本平穩(wěn)；口角無(wú)流涎；肌肉豐滿，收縮自如；毛發(fā)增加；飲食增加。
　　索拉菲尼組：大鼠體格健壯，行動(dòng)自如，和

29、正常組沒(méi)有明顯區(qū)別；目光有神；反應(yīng)敏捷，對(duì)周圍環(huán)境的刺激基本能夠及時(shí)做出回應(yīng)；呼吸基本平穩(wěn)；口角無(wú)流涎；肌肉豐滿，收縮自如；毛發(fā)整潔光亮；飲食增加。
　　4.2皂莢提取物及索拉菲尼各組對(duì)大鼠體重的影響
　　模型組和皂莢提取物低劑量組與空白組比較、皂莢提取物高劑量組和索拉菲尼組與模型組比較、皂莢提取物低劑量組和模型組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高劑量組與皂莢提取物低劑量組比較發(fā)現(xiàn)均有一定的統(tǒng)計(jì)學(xué)意義（P＜0.05）；皂莢提取物

30、高、中劑量組和索拉菲尼組與空白組比較、皂莢提取物中劑量組和皂莢提取物低劑量組與模型組比較、皂莢提取物高中劑量組和空白組與索拉菲尼組比較、皂莢提取物高低劑量組與皂莢提取物中劑量組相比較發(fā)現(xiàn)有明顯的差異（P>0.05）；此結(jié)果表明肝癌大鼠的體重明顯低于正常組，當(dāng)給予不同類型和濃度的藥物進(jìn)行治療后，大鼠的體重也有不同程度的升高。此結(jié)論同時(shí)也提示原發(fā)性肝癌大鼠經(jīng)過(guò)藥物治療后，皂莢提取物高劑量組與索拉菲尼對(duì)大鼠體重影響比較明顯，且二者的效果差異不

31、大。
　　4.3各組大鼠肝臟病理切片觀察
　　正常組：肝小葉結(jié)構(gòu)清晰完整，細(xì)胞胞漿胞核均勻，肝細(xì)胞索排列整齊,以中央靜脈為中心呈放射狀排列。胞核較大，位于肝細(xì)胞中央，整個(gè)狀態(tài)均一。肝竇內(nèi)及匯管區(qū)可見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),無(wú)纖維組織增生。
　　模型組：肝小葉失去正常結(jié)構(gòu)，大部分肝小葉被腫瘤組織代替，周邊的肝小葉受壓質(zhì)地變實(shí)，肝竇擴(kuò)張，肝血竇周圍可見(jiàn)纖維組織增生。匯管區(qū)明顯增寬,有大量的成纖維細(xì)胞、纖維細(xì)胞。腫瘤細(xì)胞呈圓形，再

32、生活躍，異型性明顯，細(xì)胞核染色變深，核質(zhì)比變大，部分出現(xiàn)核固縮和核碎裂現(xiàn)象，腫瘤細(xì)胞呈團(tuán)塊狀分布，有的部分出現(xiàn)凝固性壞死，染色呈深紅色。
　　中藥低劑量組：相對(duì)于模型組，肝小葉失去正常結(jié)構(gòu)，一部分肝小葉被腫瘤組織取代；細(xì)胞形態(tài)有些許的改善，但是依然出現(xiàn)很嚴(yán)重的核固縮現(xiàn)象，核質(zhì)比很大，部分細(xì)胞呈團(tuán)塊狀。肝竇擴(kuò)張，肝血竇周圍有纖維組織增生。
　　中藥中劑量組：相對(duì)于模型組，有較大程度的改善，可明顯看出肝小葉的結(jié)構(gòu)有了一定的恢復(fù)，

33、腫瘤組織、異型性細(xì)胞數(shù)量和過(guò)塑細(xì)胞數(shù)量減少，核質(zhì)比較大的細(xì)胞數(shù)量也明顯減少。肝血竇周圍偶爾可見(jiàn)到纖維組織增生。
　　中藥高劑量組：從形態(tài)上來(lái)看，肝小葉結(jié)構(gòu)基本清晰完整，細(xì)胞胞漿胞核均勻，大部分肝小葉細(xì)胞正常，部分細(xì)胞有核固縮和異型性的現(xiàn)象，但是相較于模型組，狀態(tài)改善很明顯。肝血竇周圍很少見(jiàn)到纖維組織增生。
　　索拉菲尼組：肝小葉結(jié)構(gòu)基本清晰完整，細(xì)胞胞漿胞核均勻，肝細(xì)胞索排列整齊,以中央靜脈為中心呈放射狀排列。胞核較大，位于

34、肝細(xì)胞中央，整體分布較均一。肝竇內(nèi)及匯管區(qū)可見(jiàn)少量淋巴細(xì)胞浸潤(rùn),基本沒(méi)有纖維組織增生。與正常組相比，有很少部分細(xì)胞的形態(tài)出現(xiàn)異型性，無(wú)團(tuán)狀分布現(xiàn)象。
　　四、結(jié)論：
　　1.皂莢提取物各劑量組和索拉菲尼對(duì)肝癌大鼠的腫瘤細(xì)胞均具有抑制作用，其中皂莢提取物高劑量組和索拉菲尼組的抑制效果最為明顯，且二者之間沒(méi)有明顯的差異；皂莢中低劑量組次之，空白組和模型組沒(méi)有抑制作用。
　　2.皂莢提取物抑制大鼠原發(fā)性肝癌的機(jī)理，從PI3K