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1、中國農(nóng)業(yè)大學碩士學位論文表達OCI和SOS基因的轉(zhuǎn)基因甘薯植株的再生和鑒定姓名:張美彥申請學位級別:碩士專業(yè):作物遺傳育種指導教師:劉慶昌20070501AbstractThetransfonntionwasstudiedbyusingembryogenicsuspensionculturesofsweetpotatocvsXushu18andLizbdangandAgrobacteriumtwnefaciensstrainEHAl05
2、harboringabinaryvectorpCAMBIAl301orpCAMBIA3301ThebinaryvectorpCAMBIAl301containsOryzacystatinIgene(卿,13glncuronidnsegene刪)andneomycinphosphotransferasegene(NPTII)ThebinaryvectorpCAMBIA3301containssaltoverlysensitivegenes
3、SOS(SOSlSOS2&sos3)andbargeneThemainresultsaleasfollowsCellaggregatesfromembryogenicsuspensionculturesofXushu18werecoeultivatedfor3dayswiththeAtumefaciensstrainEHAl05harboringabinaryvectorpCAMBIAl301onthesolidMSmediumwith
4、20mg/L24Dand30mg/LASTheresultsindicatedthatthefrequencyofcellaggregatesexpressingtransientGUSactivityreached9267%The1560inoculatedcellaggregateswerefirstculturedonMSmediumcontaining20mg,L2,4Dand100mg/LCarbfor1weekandthen
5、culturedontheselectionmediumwith20mg/L2,4D’100mg,LCarband7mg,LHygandformed133HygresistantcallusesAftertransferredtosolidMSmediumwith10mgCtABAandlOOmg/LCarbtheyregenerated552plantsGUSassayofthe30regeneratedplantsrandomlys
6、ampledshowedthat10ofthem(3333%1expressedGUSactivityPCRandSouthernblotanalysesofthe24regeneratedplantsrandomlysampleddemonstratedthat8ofthem(33%)weretransgenicplantsCellaggregatesfromembryogenicsuspensionculturesofLizixia
7、ngwerecocultivatedfor3dayswiththeAtumefaciensstrainEHAl05harboringabinaryvectorpCAMBIA3301onthesolidMSmediumwith20mg/L24Dand30mg/LASAfterculturedoiltheselectionmediumwith20mg/t2,4D,100mg/LCarband05mgCtPPT’the320inoculate
8、dcellaggregatesproduced3PPTresistantcallusesThePPTresistantcallusesweretransferredtoMSmediumwith10mg/LABAand100mg/LCarbandregenerated7plantsPCRassayshowedthat4ofthe7regeneratedplants(58%)weretransgenicplantsKeywords:Swee
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