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1、目的:通過檢測(cè)特發(fā)性血小板減少性紫癜(idiopathic thrombocytopenicpurura,ITP)患者外周血CD3+,CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡率、CD8+T淋巴細(xì)胞占淋巴細(xì)胞比例及其CX3CR1mRNA的表達(dá)水平,探討T淋巴細(xì)胞免疫在ITP發(fā)病機(jī)制中的作用,為ITP患者,尤其是難治性ITP患者的臨床免疫治療提供一條新途徑。 方法:首先應(yīng)用流式細(xì)胞儀分別檢測(cè)初治ITP患者及正常對(duì)照外周血CD3+、CD4+、
2、CD8+T淋巴細(xì)胞的凋亡率。然后,分離ITP患者及正常對(duì)照外周血單個(gè)核細(xì)胞(peripheral blood mononuclear cell,PBMC),將其分成A、B兩組,A組加入白介素2(IL-2),B組加入IL-2和地塞米松共培養(yǎng),分別于24小時(shí)和48小時(shí)收獲細(xì)胞,檢測(cè)CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的凋亡率。初治ITP患者以大劑量地塞米松(HD-DXM)沖擊治療,外周血象血小板計(jì)數(shù)恢復(fù)正常后采集外周血,檢測(cè)CD3+、CD
3、4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的凋亡率。檢測(cè)初治ITP患者和正常對(duì)照外周血CD8+T淋巴細(xì)胞所占淋巴細(xì)胞比例,然后分離初治ITP患者和正常對(duì)照PBMC,磁珠分選PBMC中CD8+T淋巴細(xì)胞,應(yīng)用熒光定量RT-PCR分析CX3CRlmRNA的表達(dá)水平。 結(jié)果:(1)初治ITP組CD3+,CD4+,CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡率均明顯低于正常對(duì)照(P值均<0.01)。細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)ITP組A、B兩組間CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡
4、率間差別無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均>0.05),而48小時(shí)B組CD3+,CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的凋亡率明顯高于A組(P值分別<0.05,0.01,0.01);正常人B組CD3+,CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡率在24小時(shí)和48小時(shí)均高于A組(P值均<0.05)。ITP組細(xì)胞培養(yǎng)24小時(shí)A,B兩組間CD3+、CD4+,CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡率的差值均明顯低于正常對(duì)照組(p值分別<0.01,0.05,0.05),48小時(shí)兩組凋亡率的差值則
5、無差別(P值均>0.05)。經(jīng)大劑量地塞米松治療后,ITP患者CD3+、CD4+,CD8+T淋巴細(xì)胞凋亡率均高于治療前(P值均<0.01),與正常對(duì)照比較差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P值均>0.05)。(2) lTP患者外周血CD8+T淋巴細(xì)胞的比例增加(P<0.05),且CD8+T淋巴細(xì)胞CX3CRlmRNA的表達(dá)水平亦高于正常對(duì)照(P<0.01)。 結(jié)論:(1)lTP患者外周血CD3+、CD4+、CD8+T淋巴細(xì)胞的凋亡率降低,并對(duì)地
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