1、目的：研究Aβ25-35誘導的AD大鼠認知功能障礙、海馬組織形態(tài)、及TRAIL蛋白表達的變化，進一步闡明AD的發(fā)病機制。 方法： (1)實驗動物模型：根據(jù)文獻報道，選用智能正常的健康雌性。Wistar大鼠，麻醉成功后，固定于腦立體定向儀上，頭頂部正中切口暴露前囟。參照大鼠腦立體定向儀圖譜，雙側海馬注射Aβ25-35各1ul(5ug)。13天后，進行morris水迷宮訓練5天，記錄第五天的逃避潛伏期，明顯高于假手術組，說明

2、造模成功。 (2)Aβ25-35誘導大鼠AD的實驗： 將75只大鼠，隨機分為正常組、模型組、雌激素治療組，共3組。模型組及雌激素治療組雙側海馬各注射1ul的Aβ25-35。手術后第二天，雌激素治療組予苯甲酸雌二醇(1mg/kg.d)肌注。給藥后13天，各組進行morris水迷宮訓練5天，記錄成績。 實驗結束后，將大鼠麻醉，予4％多聚甲醛進行心臟灌注，取腦，制作病理標本，光鏡觀察海馬組織形態(tài)學，免疫組織化學法檢測海

3、馬TRAIL的表達。 結果： 1.大鼠認知功能的觀察Morris水迷宮成績測試，隨著訓練的進行，各組大鼠逃避潛伏期逐漸縮短。記錄第5天成績，Aβ組與正常組相比，逃避潛伏期明顯延長，撤離平臺后大鼠在原平臺象限內(nèi)游泳的時間占整個游泳時間的百分比顯著降低，穿過平臺所在位置的次數(shù)明顯減少，P＜0.01；給予雌激素治療后，與Aβ組相比，逃避潛伏期明顯縮短，大鼠在原平臺象限內(nèi)游泳的時間占整個游泳時間的百分比顯著升高，穿過平臺所在位置

4、的次數(shù)明顯增加，P＜0.05。 2.大鼠海馬組織病理學觀察HE染色顯示，Aβ組大鼠海馬CA1-CA4區(qū)及齒狀回神經(jīng)元數(shù)量較正常組明顯減少，可見較多的神經(jīng)細胞胞質(zhì)濃染，核固縮。雌激素治療組神經(jīng)元數(shù)量較Aβ組增多，胞質(zhì)濃染神經(jīng)元少見。 3.免疫組織化學法檢測大鼠海馬組織TRAIL的表達注射Aβ25-35后，大鼠海馬區(qū)TRAIL的表達明顯增加，與正常組相比較，P＜0.01。給予雌激素后，TRAIL蛋白的表達明顯降低，P＜0.0

5、1。各組間TRAIL蛋白免疫反應強度光密度比較，Aβ組較正常組明顯增高，二者有顯著性差異，P＜0.01；與Aβ組相比，雌激素組有顯著性差異，P＜0.01。 結論：Aβ25-35所致AD大鼠模型出現(xiàn)明顯認知功能障礙，海馬組織中TRAIL蛋白的表達明顯增多，通過雌激素的作用，TRAIL蛋白表達減少，大鼠學習記憶功能改善，提示AD與TRAIL誘導的神經(jīng)元凋亡有明顯關系，雌激素通過抑制TRAIL的表達，減少神經(jīng)元凋亡，達到治療AD的目的