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![5-ALA-PDT對(duì)婦科惡性腫瘤細(xì)胞的殺傷作用及對(duì)SKOV3細(xì)胞HSP70、HO-1和HIF-1α表達(dá)的影響.pdf_第1頁(yè)](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/19/12/d2744ba2-30f3-4842-b587-fac95113ac75/d2744ba2-30f3-4842-b587-fac95113ac751.gif)
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文檔簡(jiǎn)介
1、婦科腫瘤的傳統(tǒng)治療方法是手術(shù)、放療和化療,這些方法在殺傷腫瘤細(xì)胞的同時(shí),會(huì)對(duì)正常細(xì)胞產(chǎn)生不可避免的損傷,從而帶來一些嚴(yán)重的并發(fā)癥,有時(shí)不得不終止治療。對(duì)于不能耐受手術(shù)、放化療的患者,拒絕手術(shù)治療的患者以及對(duì)化療產(chǎn)生耐藥的患者,迫切需要一種溫和有效的治療方法。光動(dòng)力療法(photodynamic therapy,PDT)治療婦科腫瘤由此應(yīng)運(yùn)而生。不同腫瘤對(duì)PDT的敏感性不同。PDT致腫瘤細(xì)胞的凋亡率未達(dá)到100%,提示細(xì)胞中可能存在某些抵
2、抗PDT的保護(hù)因素。研究表明,腫瘤細(xì)胞中的熱休克蛋白70(heat shock protein70,HSP70)、血紅素加氧酶-1(heme oxygenase-1,HO-1)及缺氧誘導(dǎo)因子-1α(hypoxia inducible factor-1α,HIF-1α)可在氧化應(yīng)激狀態(tài)及某些藥物作用下被激活,抑制細(xì)胞凋亡,從而起到保護(hù)腫瘤細(xì)胞的作用。本研究旨在體外細(xì)胞實(shí)驗(yàn)研究5-氨基酮戊酸(5-aminolevulinic acid,5-
3、ALA)介導(dǎo)的光動(dòng)力療法(5-ALA-PDT)對(duì)人類卵巢癌SKOV3細(xì)胞系、富頸癌Hela細(xì)胞系和子宮內(nèi)膜癌KLE細(xì)胞系的殺傷作用,觀察5-ALA-PDT對(duì)卵巢癌SKOV3細(xì)胞系HSP70、HO-1及HIF-1α表達(dá)的影響。
目的:探討5-ALA-PDT對(duì)體外培養(yǎng)的人卵巢癌SKOV3細(xì)胞、宮頸癌Hela細(xì)胞和子宮內(nèi)膜癌KLE細(xì)胞的殺傷作用。
方法:選擇人卵巢癌SKOV3細(xì)胞系、宮頸癌Hela細(xì)胞系和子宮內(nèi)膜癌
4、KLE細(xì)胞系,分為僅加光敏劑而不照光的單純光敏劑組(5-ALA組)、僅照光而不加光敏劑的單純照光組(PDT組)、既加光敏劑又照光的5-ALA-PDT組和既不加光敏劑也不照光的正常對(duì)照組。在培養(yǎng)過程中對(duì)不同組別的3種細(xì)胞進(jìn)行干預(yù)。采用CCK-8法檢測(cè)5-ALA-PDT對(duì)3種細(xì)胞增殖的抑制作用。
結(jié)果:5-ALA組細(xì)胞在0.1~1mM濃度時(shí)幾乎無死亡,>2.0mM時(shí)細(xì)胞抑制率升高(SKOV3:2.0mM,2.83%;4.0Mm
5、,6.30%。Hela:2.0mM,4.79%;4.0Mm,7.78%。KLE:2.0mM,8.90%:4.0Mm,10.58%。),分別與正常對(duì)照組相比較,均有顯著性差異(P<0.05)。PDT組細(xì)胞與正常對(duì)照組相比,生長(zhǎng)基本不受影響(P>0.05)。5-ALA-PDT組SKOV3、Hela和KLE細(xì)胞的抑制率均表現(xiàn)為隨著5-ALA濃度及激光能量密度的升高而升高(P<0.05);當(dāng)光敏劑濃度達(dá)到2.0mM,激光能量密度達(dá)到5.0J/c
6、m2時(shí),細(xì)胞生長(zhǎng)抑制率上升不明顯(P>0.05),進(jìn)入平臺(tái)期。5-ALA-PDT后細(xì)胞抑制率隨時(shí)間變化,24h達(dá)到高峰,以后逐漸下降。SKOV3的IC50值最高(P<0.05)。
結(jié)論:5-ALA-PDT對(duì)SKOV3、Hela和KLE細(xì)胞有殺傷作用,該作用存在濃度飽和及光能量飽和現(xiàn)象;5-ALA-PDT后細(xì)胞抑制率具有時(shí)效性;3種細(xì)胞對(duì)5-ALA-PDT的敏感性不同,其中SKOV3最不敏感。
目的:探討5-A
7、LA-PDT對(duì)人卵巢癌SKOV3細(xì)胞系HSP70、HO-1及HIF-1α表達(dá)的影響。
方法:選擇人卵巢癌SKOV3細(xì)胞系,分為既加光敏劑又照光的5-ALA-PDT組和既不加光敏劑又不照光的正常對(duì)照組。熒光Real-timePCR相對(duì)定量法檢測(cè)卵巢癌細(xì)胞系SKOV3細(xì)胞正常對(duì)照組及5-ALA-PDT組干預(yù)后3h、12h、24h、48h、72h后HSP70、HO-1及HIF-1α的表達(dá)情況。
結(jié)果:5-ALA-P
8、DT組的3種細(xì)胞干預(yù)后,隨著時(shí)間的推移(3h,12h,24h,48h,72h),HSP70的表達(dá)呈上升趨勢(shì),12h組與3h組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),24h組和正常對(duì)照組、3h組及12h組相比均有明顯差異(P<0.05);HO-1的表達(dá)呈上升趨勢(shì),各時(shí)間組相比均無顯著差異(P>0.05);HIF-1α的表達(dá)呈上升趨勢(shì),12h組與3h組相比差異無統(tǒng)計(jì)學(xué)意義(P>0.05),24h組和正常對(duì)照組、3h組相比均有明顯差異(P<0.
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