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文檔簡(jiǎn)介
1、目的:研究體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞,經(jīng)不同濃度脂多糖(LPS)作用后,蛻膜細(xì)胞中的炎性因子誘導(dǎo)酶環(huán)氧合酶2(COX-2)表達(dá)差異,探索COX-2過(guò)度表達(dá)與蛻膜細(xì)胞感染的相關(guān)性。
方法:收集正常早孕期人工流產(chǎn)術(shù)中的蛻膜組織,進(jìn)行體外原代細(xì)胞培養(yǎng)。當(dāng)蛻膜細(xì)培養(yǎng)3-4代后將其分成5組,分別加入脂多糖使其終濃度分別為0ng/ml、25ng/ml、50ng/ml、100ng/ml、200ng/ml。作用蛻膜細(xì)胞48小時(shí)后,1)通過(guò)激光共
2、聚焦-免疫熒光技術(shù)檢測(cè)COX-2蛋白在蛻膜細(xì)胞中的表達(dá)差異2)在收集各組的蛻膜細(xì)胞提取mRNA,并采用半定量逆轉(zhuǎn)錄聚合酶鏈反應(yīng)法(RT-PCR)檢測(cè)各組中COX-2 mRNA的表達(dá)水平,并分析各組間的表達(dá)有無(wú)統(tǒng)計(jì)學(xué)差異。
結(jié)果:1)通過(guò)激光共聚焦-免疫熒光染色技術(shù)檢測(cè)到各組人蛻膜細(xì)胞后,細(xì)胞質(zhì)及細(xì)胞核中均有COX-2蛋白表達(dá),且加入LPS作用后各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比,COX-2表達(dá)差異顯著,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且隨著
3、LPS濃度逐漸升高,COX-2蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng)。2)不同濃度LPS作用蛻膜細(xì)胞后,各實(shí)驗(yàn)組與對(duì)照組相比較,COX-2mRNA表達(dá)差異顯著,P<0.05,有統(tǒng)計(jì)學(xué)意義;且隨著LPS濃度的增加,COX-2mRNA表達(dá)逐漸增強(qiáng)。
結(jié)論:1)LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后,COX-2的蛋白表達(dá)增加,且隨著LPS的濃度逐漸增加COX-2蛋白表達(dá)逐漸增強(qiáng);2)LPS作用于體外培養(yǎng)的人蛻膜細(xì)胞后,COX-2的mRNA表達(dá)增加,且隨著
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