組織工程化肌腱體外動(dòng)態(tài)構(gòu)建初步研究.pdf_第1頁(yè)
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1、目的:以生物衍生肌腱為支架,新生小雞屈趾肌腱的肌腱細(xì)胞為種子細(xì)胞,在動(dòng)態(tài)三維細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中,初步探索合適的周期性牽張應(yīng)力加載參數(shù)以及其作用效果,為體外動(dòng)態(tài)構(gòu)建組織工程化肌腱提供實(shí)驗(yàn)依據(jù)。 方法:①用Handerson分步酶消化法分離新生小雞屈趾肌腱的肌腱細(xì)胞,用2~4代的細(xì)胞作為種子細(xì)胞。②用INSTRON8874生物力學(xué)測(cè)試系統(tǒng)(InstronCO.,USA)作生物衍生肌腱支架的單軸拉伸實(shí)驗(yàn),測(cè)定生物衍生肌腱支架的力學(xué)特性并與正

2、常人體肌腱的力學(xué)特性作比較。檢驗(yàn)生物衍生肌腱支架是否適合作為體外三維動(dòng)態(tài)構(gòu)建組織工程肌腱的細(xì)胞支架。③將肌腱細(xì)胞與生物衍生肌腱支架復(fù)合物作靜態(tài)培養(yǎng),作掃描電鏡觀察細(xì)胞在支架表面的生長(zhǎng)情況,以檢測(cè)生物衍生肌腱支架的細(xì)胞相容性。④將肌腱細(xì)胞與生物衍生肌腱支架復(fù)合物置于動(dòng)態(tài)細(xì)胞培養(yǎng)系統(tǒng)中,在不同參數(shù)的周期性牽張應(yīng)力的作用下進(jìn)行體外三維動(dòng)態(tài)培養(yǎng)。用細(xì)胞計(jì)數(shù)檢測(cè)細(xì)胞增殖,用高效液相色譜(HPLC)檢測(cè)羥脯氨酸含量,用掃描電鏡觀察細(xì)胞形態(tài),評(píng)價(jià)不同

3、參數(shù)的周期性牽張應(yīng)力對(duì)肌腱細(xì)胞增殖、功能、及排列的影響。⑤將肌腱細(xì)胞與生物衍生肌腱支架復(fù)合物分別作靜態(tài)培養(yǎng)及動(dòng)態(tài)培養(yǎng)96小時(shí)后行石蠟切片、HE染色,觀察細(xì)胞在生物衍生肌腱支架內(nèi)部的生長(zhǎng)情況。 結(jié)論:①生物衍生肌腱支架由于具備優(yōu)良的力學(xué)性能以及細(xì)胞相容性,是體外構(gòu)建組織工程肌腱的良好細(xì)胞支架;生物衍生肌腱支架還是研究三維培養(yǎng)條件下周期性牽張應(yīng)力對(duì)肌腱細(xì)胞作用的良好載體。②特定參數(shù)三維培養(yǎng)條件下,周期性牽張應(yīng)力有效地促進(jìn)了肌腱細(xì)胞的增

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