1、研究目的：
　　 喉癌、下咽癌是惡性程度極高的一種腫瘤，以鱗癌多見，約占全身惡性腫瘤的1-5％，常伴有周圍淋巴結(jié)的轉(zhuǎn)移，目前手術(shù)切除是治療此類疾病的主要方法。此類腫瘤的發(fā)生是多因素協(xié)同效應(yīng)的結(jié)果。其中，慢性炎癥在咽喉部腫瘤的發(fā)生、發(fā)展過程中起重要作用。
　　 Toll樣受體(Toll-like receptor，TLR)是重要的模式識別受體(pattern recognitionreceptor，PRR)家族，識別高度保

2、守的微生物成分-病原相關(guān)分子模式(pathogen-associatedmolecular pattern，PAMP)以及內(nèi)生性損傷信號相關(guān)分子模式(damage-associated molecularpattern，DAMP)。TLR是經(jīng)典的跨膜蛋白，作為最具特征性的模式受體分子，TLR可以募集多種配體蛋白，激發(fā)信號轉(zhuǎn)導(dǎo)，導(dǎo)致特異性轉(zhuǎn)錄因子的活化，最終產(chǎn)生抗菌肽、促炎性細胞因子和趨化因子、抗病毒細胞因子、黏附分子以及其它活性因子。<

3、br>　　 研究發(fā)現(xiàn)，TLR不僅在免疫細胞中表達，還在多種惡性腫瘤細胞，尤其是炎癥相關(guān)性腫瘤細胞呈現(xiàn)高表達，并且在腫瘤的發(fā)生、發(fā)展和治療中發(fā)揮重要作用。本研究擬在轉(zhuǎn)錄水平及蛋白水平研究TLR2、3和4在喉癌及下咽癌組織中的表達情況，并以癌旁組織及息肉組織為對照。在本研究結(jié)果的基礎(chǔ)上，參考并結(jié)合其他研究成果，探討TLR2、3和4在喉癌及下咽癌發(fā)生、發(fā)展、侵襲及轉(zhuǎn)移過程中的作用，以期為癌癥的臨床診斷、預(yù)防及治療提供更多的科研思路。

4、　　 研究方法和結(jié)果：
　　 1.RT-PCR法檢測TLR2、3和4 mRNA在不同組織中的表達水平
　　 1.1 TLR2、3和4 mRNA在癌組織與息肉組織中的表達差異
　　 TLR2、3和4在癌組織中均有表達，而在息肉組織中幾乎不表達。其中TLR4表達最強，其次是TLR2。TLR2、3和4在癌組織中的表達強度顯著強于息肉組織，TLR2t值=6.723，TLR3 t值=4.976，TLR4 t值=7.645

5、。P＜0.01。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果具有顯著意義。
　　 1.2 TLR2、3和4mRNA在癌組織與癌旁組織中的表達差異
　　 TLR2、3和4mRNA在癌組織及癌旁組織中均有表達，它們在癌組織中的表達強度顯著高于癌旁組織，分別為:TLR2t值=6.179，TLR3 t值=4.831，TLR4t值=6.057，P＜0.01。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果具有顯著意義。
　　 1.3 TLR2、3和4 mRNA在不同腫瘤分期的中的表達差

6、異
　　 TLR2、3和4mRNA在腫瘤臨床分期及TNM分期中的表達有顯著差異，其表達強度隨分期增加而增強。ANOVA分析結(jié)果:臨床分期中:TLR2 F值=5.150，TLR3 F值=3.700，TLR4 F值=4.862，P均＜0.05。TNM(N)分期中:TLR2 F值=5.562，TLR3 F值=7.200，TLR4 F值=15.039，P＜0.05。統(tǒng)計學(xué)分析結(jié)果均具有顯著意義。
　　 1.4 TLR2、3和4m

7、RNA在癌組織病理學(xué)分級中的表達差異
　　 TLR2、4 mRNA在癌組織中的表達強度與腫瘤惡性程度顯著相關(guān)，TLR3 mRNA在癌組織中的表達強度與腫瘤惡性程度無顯著統(tǒng)計學(xué)意義。
　　 2.Westeron blot法檢測TLR2、4蛋白在不同組織中的表達水平
　　 2.1 TLR2、4蛋白在癌組織與息肉組織中的表達差異
　　 TLR2、4蛋白在癌組織中的表達強度明顯高于息肉對照組織。
　　 2

8、.2 TLR2、4蛋白在癌組織與癌旁組織中的表達差異
　　 TLR2、4蛋白在癌組織中的表達強度明顯高于癌旁組織。
　　 2.3 TLR2、4蛋白在不同腫瘤分期的中的表達差異
　　 TLR2、4蛋白在癌組織中的表達強度隨腫瘤臨床分期及TNM分期的增加而增強。
　　 2.4 TLR2、4蛋白在腫瘤組織病理學(xué)分級中的表達差異
　　 TLR2、4蛋白在癌組織中的表達強度隨腫瘤惡性程度的增加而表達增強。<

9、br>　　 3.免疫組化法檢測TLR2、4蛋白在細胞中的表達部位。
　　 在細胞膜與細胞質(zhì)內(nèi)均可見抗體結(jié)合反應(yīng)，表明TLR2及TLR4表達于細胞膜與細胞質(zhì)內(nèi)。
　　 研究結(jié)論:
　　 1.TLR2、3和4 mRNA及TLR2、4蛋白在喉癌、下咽癌癌組織中的表達較為普遍，而在息肉組織中基本不表達。
　　 2.TLR2及TLR4表達于細胞膜與細胞質(zhì)內(nèi)。
　　 3.TLR2、3和4 mRNA及TLR2

10、、4蛋白在喉癌、下咽癌癌組織中的表達強度較在癌旁組織顯著增強。
　　 4.TLR2、3和4 mRNA及TLR2、4蛋白在喉癌、下咽癌癌組織中的表達強度隨腫瘤臨床分期的增加而增強。
　　 5.TLR2、3和4 mRNA及TLR2、4蛋白在喉癌、下咽癌癌組織中的表達強度隨腫瘤N分期的增加而增強。
　　 6.TLR2、4 mRNA及蛋白在癌組織中的表達強度與腫瘤惡性程度顯著相關(guān)，TLR3 mRNA及蛋白在癌組織中的表達