1、第一部分犬頸動(dòng)脈的脫細(xì)胞及肝素結(jié)合處理 目的：冠狀動(dòng)脈旁路移植術(shù)(coronary artery bypass grafting,CABG)對(duì)移植血管需求量大,自體血管常無法滿足.目前的小口徑人工血管易產(chǎn)生血栓.心血管組織工程的技術(shù)為CABG橋材料的來源提供了新的思路,但構(gòu)建組織工程血管(tissue engineering blood vascular,TEBV)花費(fèi)時(shí)間長(zhǎng)。本實(shí)驗(yàn)應(yīng)用組織工程中的脫細(xì)胞技術(shù)及肝素結(jié)合處理,試圖

2、短時(shí)、高效地為CABG提供新的橋材料來源. 方法：取新鮮犬頸動(dòng)脈,應(yīng)用酶－去污劑法行脫細(xì)胞處理,脫細(xì)胞后部分血管再進(jìn)行肝素共價(jià)結(jié)合.用機(jī)械性能測(cè)試觀察脫細(xì)胞及肝素處理前后基質(zhì)的物理性能變化；組織學(xué)及掃描電鏡(scanning electronmicroscopy,SEM)觀察脫細(xì)胞效果和膠原纖維、彈力纖維改變；甲苯胺藍(lán)染色及凝血時(shí)間觀察肝素結(jié)合程度及抗凝作用. 結(jié)論：酶－去污劑法脫細(xì)胞效果好,且有良好的保護(hù)基質(zhì)的能力；肝

3、素能穩(wěn)定地結(jié)合于血管壁并發(fā)揮作用.酶－去污劑法聯(lián)合肝素結(jié)合處理的犬頸動(dòng)脈可望作為一種新型小口徑異種移植血管。 第二部分兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型的建立 目的：建立一種兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型,能模擬CABG,為小口徑移植血管的研究提供條件. 方法：將結(jié)合與未結(jié)合肝素的脫細(xì)胞犬頸動(dòng)脈同時(shí)分別移植入6只兔的左、右頸動(dòng)脈,做端側(cè)吻合形成旁路.對(duì)移植血管及實(shí)驗(yàn)兔進(jìn)行大體觀察；術(shù)后5d超聲檢測(cè)移植血管的通暢情況；術(shù)后5d處死

4、兔,取雙側(cè)移植血管做組織學(xué)觀察. 結(jié)果：成功建立了兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型,術(shù)后所有兔均存活,1只由于技術(shù)原因致移植失敗,余5只兔無明顯不良反應(yīng)；移植血管縫合陛能好,無明顯滲漏.5只兔在術(shù)后5d作超聲檢查顯示移植血管通暢,無血栓形成；蘇木素-伊紅 (hematoxylin-eosin,HE)染色顯示雙側(cè)移植血管纖維結(jié)構(gòu)連續(xù),無明顯炎癥細(xì)胞浸潤(rùn). 結(jié)論：兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型的優(yōu)點(diǎn)是能對(duì)小口徑移植血管進(jìn)行對(duì)比研究,且模型

5、建立簡(jiǎn)便,成功率高,能模擬CABG.酶-去污劑法脫細(xì)胞后的犬頸動(dòng)脈在植入異種體內(nèi)后,無不良反應(yīng). 第三部分肝素處理與未肝素處理脫細(xì)胞小口徑異種血管的移植研究 目的：利用兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型,對(duì)脫細(xì)胞聯(lián)合肝素處理的犬頸動(dòng)脈進(jìn)行體內(nèi)研究,以評(píng)價(jià)它作為CABG的異種移植血管的可行性. 方法：將肝素處理組(n=24)與未肝素處理組(n=24)的脫細(xì)胞異種血管同時(shí)分別植入同一只的兔左、右雙側(cè)頸動(dòng)脈.對(duì)移植血管及實(shí)驗(yàn)兔做

6、大體觀察；分別于術(shù)后3周、3和6個(gè)月用超聲觀察移植血管的血流動(dòng)力學(xué)及通暢情況；術(shù)后3個(gè)月和6個(gè)月分別處死12只兔,取雙側(cè)移植血管.組織學(xué)、免疫組化及掃描電鏡以觀察血管的重塑情況；甲苯胺藍(lán)染色顯示肝素釋放情況；HE染色及圖像分析系統(tǒng)觀察移植血管的內(nèi)膜增生情況. 結(jié)論：經(jīng)酶一去污劑法脫細(xì)胞后的犬頸動(dòng)脈在植入兔雙側(cè)頸動(dòng)脈旁路移植模型后6個(gè)月,無不良反應(yīng)；移植血管通暢,還發(fā)生了較滿意的重塑.而脫細(xì)胞后再經(jīng)過肝素結(jié)合處理,可以提高通暢率,