1、中山大學碩士學位論文SAPK/JNK介導神經酰胺誘導腫瘤細胞自噬相關基因表達及其機制姓名：王琳琳申請學位級別：碩士專業(yè)：腫瘤學指導教師：朱孝峰20090525l | l I I f 大學碩I j 學位論文 S A P U J N K 介導神經酰胺誘導自噬相關基岡表達及其機制環(huán)境時( 撤銷牛長因子、缺氧、藥物、放射線) ，作為一種重要的第二信使，發(fā)揮重要作用，尤其與誘導細胞發(fā)牛凋亡有關。而最近有報道化療藥物通過神經酰胺誘導腫瘤細胞發(fā)牛非凋

2、亡性夕E 亡，而自噬在其中起到關鍵作用L 2 。自噬性細胞夕匕亡有可能成為化療、放射治療殺夕E 腫瘤細胞的一條新途徑孓5 。J N K ／c —J u n 通路是神經酰胺誘導細胞凋亡所必需的通路。最近研究證實J N K ／c ．J u n 通路與細胞饑餓時誘導自噬發(fā)生有關：J N K 能夠直接磷酸化抑制b c I ．2 ，使其不能與白噬相關基因B e c I i nl 的B H ．3 結構域結合，胞漿中游離的B e c I i nl 蛋

3、白增加，從而誘導白噬發(fā)牛。J N K 與白噬的關系非常密切，那么作為神經酰胺卜游重要的信號通路，我們考慮J N K 信號通路在神經酰胺誘導腫瘤細胞發(fā)牛白噬性死亡過程中可能發(fā)揮重要作用。B e c l i n l 是酵母自噬相關基因A t 9 6 的哺乳動物同源基因，也是第一個被發(fā)現的哺乳動物白噬相關基因。在酵母中的研究發(fā)現，A t 9 6 可作為I I I 型P 1 3 K( V p s 3 4 ) 的變構激活劑，與V p s 3 4

4、、V p s l 5 、 V p s 3 8 共同組成復合物，參與自噬體的形成。因此B e c I i nl 是一個參與自噬和調控自噬的關鍵基因，在很多細胞株發(fā)牛自噬的模型中都發(fā)現B e c l i n1 被誘導表達，但其誘導表達的機制目前尚未明確。L C 3 是酵母自噬相關蛋白A t 9 8 的哺乳動物同源基因，L C 3 翻譯后經修飾形成主要位于胞漿中的L C 3 ．I ，白噬發(fā)生時，L C 3 一I 與磷脂酰乙醇胺( P E )

5、結合，定位于自噬體膜上，即L C 3 ．I I 。它在自噬小體的延伸和閉合過程中均發(fā)揮重要功能，其作為自噬體膜的重要組份，對于白噬的產生和檢測起著不可替代的作用。目前對于L C 3 調控的研究主要集中在轉錄翻譯后的修飾水平，也有部分研究發(fā)現一些信號通路參與L C 3 基因的表達調控。在骨骼肌細胞中發(fā)現轉錄因子F o x 0 3 a 能夠結合在L C 3 啟動子上觸發(fā)其表達。U 2 0 S 細胞株過表達E 2 F l ，可以誘導L C 3