芋頭多糖的提取分離及其生物學(xué)功效的研究.pdf_第1頁
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文檔簡(jiǎn)介

1、芋頭,俗稱芋艿,營養(yǎng)豐富,膳食纖維含量高、脂肪含量很低,富含維生素和礦物質(zhì)元素,不僅可食用,在藥用方面也有一席之地。特別是芋頭中含有豐富的粘液物質(zhì),粘液的主要成分是粘多糖,有助于提高機(jī)體免疫力。大量研究表明植物多糖具有抗腫瘤、增強(qiáng)免疫力、抗氧化、抗衰老、降血糖、降血脂、抗病毒等多種藥理活性,由于其來源廣泛且?guī)缀鯖]有毒副作用,很多植物多糖已經(jīng)應(yīng)用到了保健食品、動(dòng)物養(yǎng)殖和醫(yī)藥等領(lǐng)域中。目前已提取分離并作了一定結(jié)構(gòu)鑒定的植物多糖有近百種,而關(guān)

2、于芋頭多糖的研究很少。本文以新鮮芋頭為原料,優(yōu)化芋頭中非淀粉多糖的提取工藝,分離純化芋頭粗多糖,對(duì)主要多糖組分進(jìn)行純度鑒定和結(jié)構(gòu)的初步解析;比較各組分對(duì)小鼠體外免疫細(xì)胞活性調(diào)節(jié)的影響,獲得具有良好免疫活性的多糖組分,并通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)探討活性多糖對(duì)小鼠體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)的能力。
 ?。?)采用微波輔助熱水浴法提取芋頭多糖并對(duì)其工藝進(jìn)行優(yōu)化。在單因素實(shí)驗(yàn)的基礎(chǔ)上,確定水提時(shí)間、水提溫度、微波功率、微波處理時(shí)間4個(gè)因素的Box-Benhnken

3、中心試驗(yàn)設(shè)計(jì),以多糖的提取率為指標(biāo),采用響應(yīng)面法優(yōu)化芋頭多糖的提取工藝,建立并分析各因素與指標(biāo)的數(shù)學(xué)模型。結(jié)果表明:多糖提取的最佳工藝為水提時(shí)間3h、水提溫度82℃、微波功率395W、微波時(shí)間77s、提取2次,此時(shí)多糖的實(shí)際提取率為5.57%,與理論值之間的相對(duì)誤差小于0.5%。
 ?。?)芋頭粗多糖經(jīng)過水提醇沉,酶法-Sevag法聯(lián)用法脫蛋白,透析,冷凍干燥后得到精制多糖TPS,TPS經(jīng)過DEAE-52離子交換柱和Sephade

4、xG-75凝膠色譜柱分離純化得到三種主要多糖組分TPS1p、TPS2p1和TPS3p2,HPLC和UV分析結(jié)果表明TPS1p和TPS2p1是均一多糖物質(zhì),而TPS3p2可能是一種蛋白含量很少的糖-蛋白復(fù)合物;TPS1p、TPS2p1和TPS3p2的相對(duì)分子量分別為7.9×104Da,1.1×105Da和1.3×105Da,GC分析結(jié)果表明三種多糖組分均是由阿拉伯糖、甘露糖、葡萄糖和半乳糖四種單糖組成;四種單糖組成的摩爾比分別為2.76:

5、2.12:7.61:3.30、2.44:4.07:1.87:12.1、1.27:1.89:1.13:5.97。IR分析結(jié)果表明三種組分均有明顯的多糖特征吸收峰,而且均是由β糖苷鍵連接起來的吡喃環(huán)結(jié)構(gòu)。
 ?。?)考察25、50、100μg/mL三種不同濃度的TPS、TPS1p、TPS2p1、TPS3p2四種多糖對(duì)小鼠體外免疫細(xì)胞活性調(diào)節(jié)能力的影響。結(jié)果表明:三種濃度的TPS1p均能很好的協(xié)同ConA促進(jìn)小鼠體外脾淋巴細(xì)胞的增殖,高

6、、中濃度的TPS、TPS3p2和高濃度的TPS2p1也有顯著地協(xié)同作用(P<0.05);三種濃度的TPS1p能顯著提高小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的吞噬能力;中濃度的TPS2p1和高、中濃度的TPS、TPS3p2也能顯著提高小鼠巨噬細(xì)胞的吞噬能力(P<0.05);高、中濃度的TPS1p、TPS2p1和高濃度的TPS可顯著協(xié)同LPS促進(jìn)小鼠腹腔巨噬細(xì)胞的增殖(P<0.05),而三種濃度的TPS3p2對(duì)LPS則沒有明顯的協(xié)同作用。綜合比較得出中性多糖T

7、PS1p較另外三種多糖有著良好的調(diào)節(jié)免疫細(xì)胞活性的能力。
 ?。?)探討中性多糖TPS1p對(duì)正常小鼠體內(nèi)免疫調(diào)節(jié)的影響,實(shí)驗(yàn)組分別灌胃75、150、225mg/(kg?d)三種劑量的TPS1p,陰性對(duì)照組灌胃等體積的生理鹽水,21d后處死小鼠進(jìn)行相關(guān)免疫指標(biāo)的測(cè)定。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明:與陰性對(duì)照組相比,TPS1p高、中、低劑量組均可顯著提高小鼠的脾臟指數(shù)和NK細(xì)胞的活性(P<0.05);TPS1p高、中劑量組不僅可以顯著提高正常小鼠的胸

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