1、目的：通過(guò)PCR方法研究乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1（BRMS1）在人乳腺癌細(xì)胞系MDAMB-231和MCF-7中的表達(dá)受體。通過(guò)進(jìn)行細(xì)胞功能試驗(yàn)，研究乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1（BRMS1）對(duì)于人乳腺癌細(xì)胞MDAMB-231和MCF-7在遷移、侵襲等方面的生物學(xué)影響及作用機(jī)制。通過(guò)分析臨床、病理資料，研究乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1（BRMS1）的mRNA表達(dá)水平與乳腺癌患者預(yù)后之間的相關(guān)性。
　　方法：質(zhì)粒(MDA231PEF，MCF-7PEF)通

2、過(guò)克隆到大腸桿菌中進(jìn)行轉(zhuǎn)型，然后通過(guò)PCR實(shí)驗(yàn)選擇正確的質(zhì)粒結(jié)構(gòu)并進(jìn)行擴(kuò)增。對(duì)MDAMB-231和MCF-7細(xì)胞系進(jìn)行RNA提取并進(jìn)行RNA定量，使用cDNA分析儀進(jìn)行反轉(zhuǎn)錄。通過(guò)加入核酶的PCR實(shí)驗(yàn)將BRMS1進(jìn)行部分基因敲除，將基因部分敲除的BRMS1(MDAMB231brms1kd，MCF7brms1kd)通過(guò)大腸桿菌進(jìn)行克隆，然后進(jìn)行擴(kuò)增、純化。通過(guò)PCR方法研究BRMS1在人乳腺癌細(xì)胞系MDAMB-231和MCF-7中的表達(dá)。

3、
　　在乳腺癌組織樣本中對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1(BRMS1)的基因轉(zhuǎn)錄本進(jìn)行量化，在人乳腺癌細(xì)胞系MDAMB-231和MCF-7中對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子(BRMS1)的表達(dá)進(jìn)行基因修飾，并進(jìn)一步檢測(cè)其生物學(xué)反應(yīng)，同時(shí)對(duì)影響B(tài)RMS1的關(guān)鍵信號(hào)通道進(jìn)行研究。
　　通過(guò)分析臨床、病理資料，對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1(BRMS1)在人類乳腺癌中的轉(zhuǎn)錄表達(dá)水平進(jìn)行了定量評(píng)估。
　　結(jié)果：乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1（BRMS1）被證實(shí)在人乳

4、腺癌細(xì)胞系MDAMB-231和MCF-7中均有明顯的表達(dá)。與各自的野生型及對(duì)照細(xì)胞比較，部分基因敲除后的乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子在MDAMB-231和MCF-7細(xì)胞的生長(zhǎng)、遷移、侵襲方面都有明顯的作用(p＜0.05)。磷脂酶Cγ(PLCγ)對(duì)乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子1(BRMS1)誘導(dǎo)的細(xì)胞遷移有明顯的影響。乳腺癌轉(zhuǎn)移抑制因子(BRMS1)的表達(dá)水平在高級(jí)別的腫瘤中(p=0.12)、存在遠(yuǎn)處轉(zhuǎn)移的病人中(p=0.05)及死于乳腺癌的病人中(p=0.