1、基因工程中能否使外源基因以一定的表達(dá)量在特定的組織部位表達(dá)是一個(gè)重要問(wèn)題，而啟動(dòng)子作為能夠調(diào)控外源基因在特定組織器官表達(dá)的分子元件之一，具有重要的研究意義。目前人們普遍使用的是組成型啟動(dòng)子，這類啟動(dòng)子能驅(qū)動(dòng)外源基因在植物中各部位高效的表達(dá)，但同時(shí)也造成了營(yíng)養(yǎng)的不必要浪費(fèi)以及植物細(xì)胞的過(guò)度負(fù)荷。特異性啟動(dòng)子可以通過(guò)調(diào)控目的基因使其在特定的組織部位表達(dá)。因此，對(duì)玉米中特異性啟動(dòng)子的研究不僅對(duì)改善玉米的品質(zhì)具有重要意義，而且為基因工程中調(diào)控元

2、件的研究提供了參考。
　　本課題在生物信息學(xué)的分析結(jié)果的基礎(chǔ)上，構(gòu)建了玉米CCR基因啟動(dòng)子以及其篩檢片段的表達(dá)載體，通過(guò)農(nóng)桿菌介導(dǎo)法獲得轉(zhuǎn)基因的水稻植株，并對(duì)其表達(dá)特性進(jìn)行了分析，獲得如下主要研究結(jié)果：
　　1.通過(guò)啟動(dòng)子序列分析的相關(guān)網(wǎng)站結(jié)果顯示，該啟動(dòng)子除了基本順式作用元件TATA-box和CAAT-box外，還含有四種誘導(dǎo)型元件：ARE、Box-W1、CGTCA-motif和 MBS；四種光應(yīng)答元件 Box4、Box

3、I、G-box和 Sp1；三種器官表達(dá)元件ROOTMOTIFTAPOX1、POLLEN1LELAT52和Skn-1。
　　2.從玉米基因組中分離出一段2145bp的肉桂酰輔酶 A還原酶（cinnamoyl-CoA reductase）基因啟動(dòng)子，將其命名為pCCR。通過(guò)5’端缺失法對(duì)CCR基因啟動(dòng)子的全長(zhǎng)進(jìn)行片段篩檢，得到三個(gè)不同長(zhǎng)度的篩檢片段我們分別將其命名為 pCCR-1、pCCR-2以及pCCR-3，其片段大小分別為1650

4、 bp、1126 bp以及548 bp。通過(guò)雙酶切的方法將這四個(gè)啟動(dòng)子片段與含有GUS報(bào)告基因的雙元表達(dá)載體pCAMBIA1301連接，構(gòu)建四個(gè)新型表達(dá)載體。
　　3.將構(gòu)建的四個(gè)新型表達(dá)載體運(yùn)用農(nóng)桿菌介導(dǎo)法轉(zhuǎn)入水稻中花11中，共獲得42株轉(zhuǎn)基因植株苗，其中CCR有11株，CCR-1有13株，CCR-2有8株，CCR-3有10株。通過(guò)PCR及潮霉素檢測(cè)后，共有27株為陽(yáng)性植株。
　　4.采用GUS組織化學(xué)染色方法，結(jié)果顯示C