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1、膽堿單加氧酶(CMO)是合成甜菜堿的關(guān)鍵酶,甜菜堿是一種非毒性的滲透調(diào)節(jié)劑,在植物耐鹽中起著重要的作用。CMO基因受鹽誘導(dǎo)表達(dá),隨著環(huán)境中鹽濃度的提高,CMO基因表達(dá)量增加。該基因的誘導(dǎo)表達(dá)特性一定與其啟動(dòng)子有關(guān)。本文對(duì)遼寧堿蓬CMO基因啟動(dòng)子進(jìn)行了研究。研究CMO基因啟動(dòng)子對(duì)分析CMO基因表達(dá)調(diào)控機(jī)制具有一定的理論意義,獲得鹽誘導(dǎo)啟動(dòng)子區(qū)段,應(yīng)用于植物基因工程,對(duì)提高轉(zhuǎn)基因植物的耐鹽性具有重要的應(yīng)用價(jià)值。 本文對(duì)遼寧堿蓬CMO
2、基因啟動(dòng)子進(jìn)行了系列片段缺失,系統(tǒng)研究了CMO基因啟動(dòng)子不同區(qū)段的功能,主要結(jié)果如下: 1.對(duì)CMO基因啟動(dòng)子進(jìn)行序列分析,發(fā)現(xiàn)該序列中除含有啟動(dòng)子基本元件以外,還含有三個(gè)鹽誘導(dǎo)元件以及其它脅迫誘導(dǎo)元件。 2.以雙元載體pCAMBIA1301為基礎(chǔ),構(gòu)建了含有全長(zhǎng)及系列缺失啟動(dòng)子、以GUS基因?yàn)閳?bào)告基因的系列表達(dá)載體,表達(dá)載體經(jīng)PCR、酶切鑒定正確。 3.利用農(nóng)桿菌介導(dǎo)的葉盤法轉(zhuǎn)化煙草,以潮霉素為選擇標(biāo)記,經(jīng)PC
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