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文檔簡介
1、為了解山核桃LEAFY同源基因CcLFY的表達調(diào)控規(guī)律,從分子角度解釋山核桃成花特點,我們應(yīng)用染色體步移法克隆到一條1345bp的片段,經(jīng)過軟件分析該序列含有低溫響應(yīng)元件、光響應(yīng)元件、ABA響應(yīng)元件和一些其他的調(diào)控序列,推測CcLFY的表達受低溫、光照等調(diào)控,但沒有發(fā)現(xiàn)典型的TATA-box和CAAT-box結(jié)構(gòu),僅在起始密碼子上游-86bp和-252bp處發(fā)現(xiàn)類似TATA-box和CAAT-box的結(jié)構(gòu)。經(jīng)過缺失驗證,發(fā)現(xiàn)缺失掉這段結(jié)
2、構(gòu)后的啟動子片段仍然具有啟動能力,因此我們推斷CcLFY啟動子為TATA-Iess啟動子。將山核桃CcLFY啟動子與擬南芥和楊樹LFY基因啟動子進行比較,所含的順式作用元件類型基本相同。通過對不同長度的啟動子缺失片段進行煙草瞬時表達檢測,發(fā)現(xiàn)-1302bp至-958bp和-592bp至-315bp處序列被缺失,GUS表達量增加,說明這兩處存在著反式作用因子結(jié)合部位,將其缺失掉后,這種抑制被打破。此外,TATA-box的替代機制可能存在于
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