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文檔簡介
1、在植物抗逆基因工程中,組成型啟動子已經被廣泛應用,雖然組成型啟動子驅動外源基因表達可以提高轉基因植物的抗逆性,但會導致轉基因植物生長遲緩甚至不育。應用脅迫誘導型啟動子就可以解決這個問題。
膽堿單加氧酶(choline monooxygenase,CMO)是合成甜菜堿的關鍵酶,其啟動子(pC5:-267~+1bp)是鹽誘導型啟動子。本研究用農桿菌介導的葉盤轉化法分別將pC5-CMO和CaMV35S-CMO轉入Micro-To
2、m(Solanum lycopersicum L.cv.Micro-Tom)中,對兩種轉基因Micro-Tom中CMO基因拷貝數(shù)、CMO基因表達、轉基因植株的耐鹽性及生長狀況進行分析。主要結果如下:
1、通過農桿菌轉化法成功獲得了pC5-CMO、CaMV35S-CMO轉基因Micro-Tom,通過對這些轉基因植株中外源CMO基因拷貝數(shù)的檢測,獲得了單拷貝及低拷貝的轉基因植株。
2、利用熒光定量PCR法對單拷貝
3、的轉基因植株中外源CMO基因的表達量進行檢測,結果顯示,在正常條件下pc5-CMO轉基因植株中CMO基因表達量低于CaMV35S-CMO轉基因植株,而在200 mmol/L NaCl脅迫處理48 h后,pC5-CMO轉基因植株中CMO基因表達量增加6.7倍,CaMV35S-CMO轉基因植株中CMO基因依然過量表達無明顯變化。
3、200 mmol/L NaCl脅迫處理野生和轉基因Micro-Tom一周后,野生Micro-T
4、om幾乎死亡,轉基因Micro-Tom生長正常。轉pC5-CMO、CaMV35s-CMO基因提高了Micro-Tom的抗鹽性。
4、CaMV35S-CMO轉基因Micro-Tom均表現(xiàn)出株型矮小、生長遲緩、產量下降、落花等現(xiàn)象,pc5-CMO轉基因Micro-Tom的營養(yǎng)生長、開花和產量基本和野生Micro-Tom相同。
5、獲得了既抗鹽、又能正常生長的pc5-CMO,轉基因Micro-Tom;pC5-CMO
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