1、膽堿單加氧酶(CMO)是植物體內膽堿合成甜菜堿過程中的關鍵酶。甜菜堿是一種非毒性的滲透調節(jié)劑，在植物耐鹽中起著重要的作用。CMO基因受鹽誘導表達，隨著環(huán)境中鹽濃度的提高，其基因表達量增加，CMO基因的誘導表達與其啟動子(pC：-267～+1 bp)有關。AtMYB2轉錄因子是一個受ABA和脫水誘導表達的MYB家族蛋白，它能與-CTAACCA-位點結合，促進下游基因的表達。pC序列上含有一個AtMYB2轉錄因子的識別位點。本文對AtMYB

2、2轉錄因子和CMO基因啟動子之間的相互作用進行研究，從而分析CMO基因的轉錄調控機制。
　　 本研究克隆了擬南芥的AtMYB2基因，并將該基因轉入已含有pC的煙草中，對轉基因煙草的GUS活性進行了組織化學染色及熒光定量分析分析，主要結果包括：①用RT-PCR技術獲得了擬南芥AtMYB2基因編碼區(qū)，該編碼區(qū)長822bp，編碼一個由273個氨基酸組成的多肽。將獲得的AtMYB2基因構建克隆載體pUC19-AtMYB2,凍融法導入大腸

3、桿菌感受態(tài)細胞：DH5a，得到EColi-pUC19-AtMYB2；②構建植物表達載體pBI121-AtMYB2,導入根癌農桿菌(Agrobacteriumtumfaciens)LBA4404，獲得工程菌LBA4404-pBI121-AtMYB2；③采用農桿菌介導的葉盤轉化法將AtMYB2基因導入轉pC煙草，獲得具有卡那霉素抗性的轉雙價基因煙草，PCR檢測獲得陽性植株。RT-PCR檢測表明，AtMYB2基因已在轉基因煙草中表達，GUS組