31156.atgt3b轉(zhuǎn)錄因子與cmo、badh基因啟動子相互作用分析_第1頁
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1、遼寧師范大學(xué)碩士學(xué)位論文AtGT3b轉(zhuǎn)錄因子與CMO、BADH基因啟動子相互作用分析姓名：關(guān)秋玲申請學(xué)位級別：碩士專業(yè)：細(xì)胞生物學(xué)指導(dǎo)教師：李秋莉20090501AtGT3b轉(zhuǎn)錄因子與COMBAPll基因啟動子相互作用分析AbstractCholinemonooxygcnase(CMO)andbctainealdehydedehydrogenasc(BADH)arethetwokeyenzymesforbetainesynthesisB

2、etaineisregardedasbeingakindofsmall，non—toxicosmoprotectantandplaysanimportantroleinplantsalt—toleranceOurpreliminaryworkshowedthatCMOgenepromoter(pC：267一lbp)andBADHgenepromoter(pB：一300～lbp)aresaltinducedpromotersCompare

3、dtononinductiveleaves，theGUSenzymeactivitydrivenbythesetwopromoterswasenhanced5foldand63foldrespectivelyintransgenictobaccoleavesinthepresenceof400mmol／LNaCIBothofthetwopromoterscontainbasicelements，salt—inducedelement，G

4、T一1c／selement(GAAAAA)，andotherstressinducedelementsAtGT3bisaNaClandpathogensinducedGT1liketranscriptionfactorinArabidopsisthalianaItcaninteractwithGTIc／selementandenhancetheexpressionofthedownstreamgeneBothCMOandBADHgene

5、promoterscontaintherecognitionsequenceofAtGT3b，GAAAAAInthispaperWewillstudytheinteractionofAtGT3bwithGT1c／selementandanalyzetheregulationmechanismsofCMO，BADHtranscriptionInthispaperAtGT3bgenewasclonedfromArabidopsisthali

6、anaandtransferredintothetransgenictobaccos(CSA、B5A)containingpC，pBTheexogenousgeneexpressionandGUSactivitywereanalyzedinAtGT3btransgenicplantsThemainresultsareasfollows：1AtGT3bgenewereobtainedthroughRT—PCR，includinga870b

7、pORFencodinga289一aminoacidpolypeptideThecloningvectorpMDl9TAtGT3b，wasconstructedandtransferredintoEcolicompetentcell—DH5abyliquidnitrogenfreezethawmethod2Theplantexpressionvector，pBll21AtGT3b，wasconstructedandtransferred

8、intoAgrobacteriumtumefaciensstrainLBA44043AtGT3bgenewastransferredintoC5AandB5AtobaccosviaAgrobacteriummediationPCRanalysisshowedthatkanamycinresistantAtGT3btransgenictobaccoswereobtainedRTPCRdetectionshowedthatAtGT3bgen

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