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文檔簡(jiǎn)介
1、目的：體外研究髓核細(xì)胞(nucleus pulposus cells)與骨髓間充質(zhì)干細(xì)胞(mesenchymal stem cells,MSCs)共培養(yǎng)時(shí),髓核細(xì)胞與MSCs直接和間接接觸對(duì)MSCs分化為髓核細(xì)胞的影響;為構(gòu)建組織工程髓核提供種子細(xì)胞。
方法：分別在同種間和異種間以髓核細(xì)胞誘導(dǎo)MSCs分化。DAPI(4‘,6-二咪基-2‘-苯吲哚鹽酸)標(biāo)記日本大白兔原代髓核細(xì)胞后,分別與SD大鼠和日本大白兔第三代MSCs按接觸
2、組和非接觸組共培養(yǎng)。每12小時(shí)在顯微鏡下動(dòng)態(tài)觀察MSCs的形態(tài)學(xué)變化,并用RT-PCR和Western blot方法檢測(cè)II型膠原和可凝集蛋白多糖(Aggrecan)的表達(dá)。
結(jié)果：共培養(yǎng)24小時(shí)后,在同種及異種直接接觸培養(yǎng)組中可見MSCs分化為類似髓核細(xì)胞形態(tài),細(xì)胞核周有顆粒狀聚集;細(xì)胞突起退縮呈類圓形結(jié)構(gòu);RT-PCR和Western blot檢測(cè)II型膠原和Aggrecan的表達(dá)發(fā)現(xiàn)其表達(dá)顯著增高,在第6天時(shí)達(dá)到峰值,差
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