基因表達譜芯片技術(shù)篩選腎癌細胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移相關(guān)基因.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的：建立腎癌細胞OS-RC-2骨轉(zhuǎn)移動物模型,獲得病灶腫瘤細胞株,并對兩組細胞間的基因表達譜進行對比分析,篩選差異表達基因。
　　方法：通過脛骨平臺向脛骨髓腔內(nèi)注射OS-RC-2細胞,待局部成瘤后取病灶腫瘤細胞,循環(huán)注射,最后獲得的腫瘤細胞株與OS-RC-2細胞之間分別以MTT法檢測增殖能力,Transwell法檢測侵襲能力,流式細胞技術(shù)檢測細胞周期變化。提取兩組細胞的mRNA,通過基因芯片技術(shù)進行雜交掃描和分析,結(jié)合KEGG網(wǎng)

2、站數(shù)據(jù)庫的信號通路分析,篩選出相關(guān)基因,并以RT-PCR及Westernblot法分別驗證篩選出的基因在mRNA及蛋白水平上的表達差異。
　　結(jié)果：建立腎癌骨轉(zhuǎn)移動物模型,獲得高骨轉(zhuǎn)移能力細胞株OS-RC-2-BM-3,基因芯片掃描得到差異基因共1196個,其中上調(diào)基因926個,下調(diào)基因270個,根據(jù)KEGG數(shù)據(jù)庫篩選出HIF-1α及HSP90,RT-PCR結(jié)果及Western結(jié)果均與基因芯片掃描符合。
　　結(jié)論：腎癌細胞O

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