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文檔簡(jiǎn)介
1、兔肉是一種高蛋白、高卵磷脂、高氨基酸和低膽固醇的肉類,是肥胖、肝病、心腦血管病、糖尿病患者的理想肉食。雖然兔肉是一類優(yōu)質(zhì)的肉類食品,但由于人們飲食習(xí)慣和家兔飼養(yǎng)管理因素的制約,推廣和普及程度還較低。此外,目前國(guó)內(nèi)對(duì)家兔肉質(zhì)性狀的研究遠(yuǎn)不及豬肉、禽肉等,這也是制約肉兔產(chǎn)業(yè)發(fā)展的一個(gè)重要因素。本研究選擇新西蘭白兔和福建黃兔作為研究對(duì)象,旨在探尋影響家兔肌肉發(fā)育的相關(guān)功能基因,為家兔肉質(zhì)性狀的改良提供一定的理論基礎(chǔ),也為肉用家兔的育種工作提供
2、一定的借鑒。
本研究利用表達(dá)譜芯片、熒光定量PCR、PCR-SSCP等技術(shù)分析引進(jìn)品種新西蘭白兔和我國(guó)地方品種福建黃兔這兩個(gè)肉兔品種的遺傳差異,主要結(jié)果如下:
1.利用表達(dá)譜芯片技術(shù)篩選出了新西蘭白兔和福建黃兔不同部位肌肉中的差異表達(dá)基因,包括Myh6、Myh7、Myh7b、Myo5b、Tnnc1、Tpm3、Acta2等,以上基因的表達(dá)差異水平都在3倍以上,并且與肌肉的發(fā)育聯(lián)系十分緊密。
2.熒光定量PCR
3、結(jié)果顯示家兔不同部位肌肉中Tpm3和Myh7基因的表達(dá)規(guī)律比較相似,兩個(gè)基因在背肌中的表達(dá)水平總體上高于腿肌。從兩個(gè)基因較為相似的時(shí)空表達(dá)規(guī)律來(lái)看,它們可能具有協(xié)同作用。
3.本研究挑選Myh7基因第5外顯子設(shè)計(jì)引物,該外顯子總長(zhǎng)度為109bp,所擴(kuò)增的片段包括該外顯子全長(zhǎng)及部分前后的內(nèi)含子,總長(zhǎng)度145bp。在新西蘭白兔群體中發(fā)現(xiàn)47個(gè)AA型個(gè)體,5個(gè)AB型個(gè)體;在福建黃兔群體中發(fā)現(xiàn)52個(gè)AA型個(gè)體,14個(gè)AB型個(gè)體,兩個(gè)群
4、體中均未發(fā)現(xiàn)BB型個(gè)體。新西蘭白兔群體中A(未突變)基因頻率為0.952,B(突變)基因頻率為0.048;福建黃兔群體中A(未突變)基因頻率為0.894,B(突變)基因頻率為0.106。對(duì)PCR產(chǎn)物進(jìn)行測(cè)序比對(duì)發(fā)現(xiàn),在2375處發(fā)生單堿基突變位點(diǎn),原序列上該位點(diǎn)為胞嘧啶(C),在少數(shù)個(gè)體中發(fā)現(xiàn)了胸腺嘧啶(T)。經(jīng)序列分析和密碼子比對(duì),此突變并未引起氨基酸的改變,為同義突變。Myh7蛋白二級(jí)結(jié)構(gòu)含有1935個(gè)氨基酸,其中α螺旋(h)74.
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