1、目的：觀察膠質(zhì)細胞源性神經(jīng)營養(yǎng)因子(glial cell line-derived neurotrophicfactor,GDNF)在大鼠腦缺血再灌流時分布特點，研究星形膠質(zhì)細胞(astrocyte)在大鼠腦缺血再灌流時形態(tài)改變和分布。方法：線栓法阻斷大鼠大腦中動脈（middle cerebral artery，MCA）2小時后，再灌流3小時、12小時、1天、2天、3天、5天制成腦缺血再灌流模型，每組5只。正常組大鼠3只、假手術(shù)組3只作

2、為對照組。HE染色評價缺血性腦損傷的組織學特點。免疫組織化學(immunohistochemistry, IHC)染色觀察GDNF分布的特點和星形膠質(zhì)細胞的形態(tài)、分布。結(jié)果：1.HE染色顯示再灌流3小時,紋狀體、額頂皮質(zhì)有許多神經(jīng)元(neuron)呈現(xiàn)急性期改變,即神經(jīng)元腫脹和濃縮。再灌流12小時缺血區(qū)許多神經(jīng)元呈現(xiàn)不可逆變性改變即紅神經(jīng)元(red neuron)和鬼影神經(jīng)元(ghostneuron)。再灌流1天視前區(qū)出現(xiàn)梗死灶，即神經(jīng)

3、元、膠質(zhì)細胞及微血管壞死和凋亡，呈一片無結(jié)構(gòu)淡染區(qū)。再灌流2-5天，視前區(qū)梗死灶無顯著擴大，紋狀體內(nèi)的神經(jīng)元大量丟失，額頂皮質(zhì)呈缺血性改變。2.正常組和假手術(shù)組未檢測到GDNF表達。再灌流3小時，缺血周邊區(qū)有大量GDNF弱陽性的神經(jīng)元和巨噬細胞(macrophage)。整個大腦皮質(zhì)有廣泛的GDNF弱陽性神經(jīng)元。再灌流12小時，海馬齒狀回顆粒下層(subgranular zone，SGZ)有一些GDNF中等陽性的細胞。再灌流1天，缺血周邊

4、區(qū)有較多的GDNF強陽性的細胞。再灌流2天，紋狀體內(nèi)有較多的GDNF強陽性細胞。再灌流3天，紋狀體、額頂皮質(zhì)GDNF陽性細胞數(shù)量明顯減少。再灌流5天，視前區(qū)及紋狀體無GDNF陽性細胞，大腦額頂皮質(zhì)有散在少量GDNF弱陽性的神經(jīng)元。在整個再灌流過程中GDNF陽性的細胞數(shù)在3小時達到高峰，后逐漸下降，各組與3小時比較P<0.01。3.腦缺血再灌流時，星形膠質(zhì)細胞呈反應性、營養(yǎng)不良性、退行性三種形態(tài)。 再灌流3小時,缺血周邊區(qū)出現(xiàn)少量反應性星

5、形膠質(zhì)細胞。再灌流12小時，視前區(qū)有較多的反應性星形膠質(zhì)細胞，并可見一些退行性星形膠質(zhì)細胞。再灌流24小時，視前區(qū)梗死灶周圍有較多GFAP陽性的星形膠質(zhì)細胞。再灌流3-24小時各組GFAP陽性星形膠質(zhì)細胞數(shù)量增多不明顯，與正常組和假手術(shù)組相比無顯著性差異（P>0.01）。再灌流2天，星形膠質(zhì)細胞的數(shù)量明顯增多，與再灌流3－24小時各組及對照組相比有顯著性差異(P<0.01)。再灌流3天，缺血周邊區(qū)有較多的反應性星形膠質(zhì)細胞，缺血區(qū)可見少

6、量營養(yǎng)不良性星形膠質(zhì)細胞。再灌流5天，缺血周邊區(qū)反應性星形膠質(zhì)細胞的突起彼此連接形成膠質(zhì)網(wǎng)。結(jié)論：1.改良的短暫腦缺血再灌流模型是一種研究腦缺血再灌流損傷和評價臨床藥物治療較理想的模型。2.腦缺血再灌流損傷是一個漸進的過程，額頂皮質(zhì)、紋狀體、視前區(qū)的缺血性損傷程度逐漸加重。3. 腦缺血時，變性、死亡的神經(jīng)元不表達GDNF，缺血周邊區(qū)和非缺血區(qū)神經(jīng)元GDNF表達明顯增強，提示GDNF有促進神經(jīng)元存活的作用。4.活化的小膠質(zhì)細胞或巨噬細胞可