1、腦梗死是常見的腦血管疾病，嚴重危害我國中、老年人身體健康。腦梗死所致功能障礙給患者、家庭和社會帶來了沉重的負擔。一直以來，腦梗死后神經(jīng)系統(tǒng)的可塑性和相關的神經(jīng)康復倍受專注。探索最大限度地激活腦梗死患者大腦的對抗損傷及重塑潛能的康復方法，以使患者獲得更好功能恢復，提高其生存質(zhì)量顯得非常有意義。
　　 目的：
　　 本研究提出腦缺血后EA+rTMS治療可活化AST，再通過后者有效地促進海馬突觸結(jié)構(gòu)和功能的重塑，從而促進腦缺血

2、后學習記憶功能恢復的假說，希望通過此項研究能揭示EA+rTMS治療缺血性卒中的可能機制，為進一步的完善、豐富針灸學原理和磁刺激作用機理提供科學實驗依據(jù)。
　　 方法：
　　 本研究以MCAO模型為研究對象，將Wistar大鼠隨機分為正常組、模型組、EA組、rTMS組和EA+rTMS組，根據(jù)不同時間點每個組又細分為7d、14d和28d組3個亞組，分別給予EA、rTMS、EA+rTMS干預。在不同時間點處死動物取材，首先采用

3、免疫熒光標記方法觀察不同時間點、不同干預后梗塞灶周圍及缺血側(cè)海馬CA3區(qū)AST特異性標志物GFAP蛋白及缺血側(cè)海馬CA3區(qū)突觸前膜蛋白SYN的表達，免疫組化方法考察缺血側(cè)海馬突觸后膜蛋白PSD-95的時間分布規(guī)律；然后運用蛋白印跡技術(shù)定量分析不同時間點、不同組別之間缺血側(cè)海馬SYN表達的差異；最后采用Morris Water Maze實驗評估腦缺血28d大鼠學習記憶功能的變化，透射電鏡觀察缺血側(cè)海馬CA3區(qū)突觸形態(tài)結(jié)構(gòu)的變化。
　

4、　 結(jié)果:
　　 1、腦缺血7d時，各組大鼠腦梗塞病灶周圍及腦缺血側(cè)海馬CA3區(qū)均可見到AST的活化，主要表現(xiàn)為細胞胞體肥大、突起增多、熒光強度增加，3個康復干預組AST活化更加明顯。14d時3個康復干預組GFAP陽性細胞進一步增多（P<0.05），28d時與14d時比較GFAP的表達減少，差異沒有統(tǒng)計學意義。7d和28d時EA+rTMS組缺血側(cè)海馬CA3區(qū)GFAP的表達高于EA組和rTMS組（P<0.05）。
　　

5、2、腦缺血7d時，海馬DG區(qū)和CA3區(qū)PSD-95蛋白的表達下降。經(jīng)過14d和28d的康復干預，各組大鼠海馬DG區(qū)和CA3區(qū)PSD-95蛋白的表達與模型組比較均增加，至28d時差異有統(tǒng)計學意義。28d時，EA+rTMS組大鼠海馬CA3區(qū)PSD-95蛋白的表達高于EA組和rTMS組（P<0.05）。
　　 3、EA、rTMS和EA+rTMS都能顯著上調(diào)3個時間點海馬SYN的表達。從時間上看，隨著治療時間的增加，SYN的表達逐步上調(diào)

6、；不同組間比較，28d時rTMS和EA+rTMS海馬SYN的表達最顯著。
　　 4、在Morris Water Maze訓練的第1d-3d，5組大鼠的潛伏期均逐漸縮短，各康復干預組與模型組比較差異不明顯。在訓練的第4d、5d，3個康復干預組潛伏期明顯降低，與模型組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05或P<0.01)。在測試中，模型組大鼠的逃避潛伏期比正常組明顯延長；60s內(nèi)跨越平臺次數(shù)減少,tP/tT和dP/dT下降，均提示模型組

7、大鼠存在一定的學習記憶功能障礙。3個康復干預組大鼠的逃避潛伏期縮短，60s內(nèi)跨越平臺次數(shù)增加，tP/tT和dP/dT上升，與模型組比較差異有顯著性意義(P<0.05或P<0.01)，提示經(jīng)過康復干預之后，腦缺血大鼠的學習記憶功能明顯改善。3個康復干預組間比較，EA+rTMS組大鼠的逃避潛伏期和60s內(nèi)跨越平臺次數(shù)與EA組和rTMS組比較差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
　　 5、模型組大鼠海馬CA3區(qū)突觸多為對稱性突觸，突觸小

8、泡明顯減少，線粒體變性明顯。EA組、rTMS組和EA+rTMS組突觸多表現(xiàn)為凹型或凸型的不對稱性突觸，突觸小泡明顯增多，細胞漿內(nèi)線粒體雙層結(jié)構(gòu)完整，線粒體內(nèi)嵴清楚。突觸形態(tài)圖像分析統(tǒng)計結(jié)果顯示：各組間突觸間隙寬度無顯著性差異。3個康復干預組PSD厚度、穿孔性突觸百分率比模型組顯著增加，3組間比較無顯著差異。3個康復干預組CA3區(qū)突觸的突觸界面曲率顯著增加，EA+rTMS組大于EA組和rTMS組，差異有統(tǒng)計學意義。
　　 結(jié)論:<

9、br>　　 1、EA、rTMS和EA+rTMS均可活化腦缺血大鼠梗塞灶周圍和缺血側(cè)海馬CA3區(qū)AST，這種活化不是單方向的上調(diào)。
　　 2、隨著干預時間的延長，EA、rTMS和EA+rTMS均可逐步增加腦缺血海馬SYN和PSD-95的表達。
　　 3、EA、rTMS和EA+rTMS可提高腦缺血大鼠學習記憶功能和改善腦缺血大鼠海馬突觸的超微結(jié)構(gòu)。
　　 4、EA+rTMS在促進AST活化和海馬突觸重塑中優(yōu)于EA和