1、背景及目的:
　　 結(jié)直腸癌的發(fā)生、發(fā)展涉及多種基因的異常改變。已有研究表明，慢性腸道炎癥增加了結(jié)直腸癌發(fā)生進展的危險性，Toll樣受體4(toll-likereceptor4，TLR4)在腸道慢性炎癥中發(fā)揮關(guān)鍵作用，TLR4可以促進結(jié)直腸癌發(fā)生、發(fā)展，但其機制尚不完全清楚。另外，我們前期研究發(fā)現(xiàn):結(jié)直腸癌中Fas配體(Fasligand，F(xiàn)asL)表達明顯升高，可以誘導(dǎo)機體淋巴細胞凋亡，反擊機體免疫體統(tǒng)。表皮生長因子受體(ep

2、idermalgrowthfactorreceptor，EGFR)在結(jié)直腸癌中表達升高，可以促進結(jié)直腸癌的生長和轉(zhuǎn)移。本文擬通過觀察TLR4、FasL和EGFR在結(jié)直腸癌和正常大腸組織中的表達情況，分析TLR4表達與結(jié)直腸癌臨床病理學(xué)特征的關(guān)系，判斷其臨床意義和預(yù)后，分析TLR4表達與FasL和EGFR表達的關(guān)系，研究TLR4促進結(jié)直腸癌發(fā)生發(fā)展的機制。
　　 方法:
　　 采用免疫組織化學(xué)法檢測2007年至2011年間

3、58例經(jīng)手術(shù)切除后且經(jīng)病理證實為結(jié)腸癌或者直腸癌的標本和25例正常大腸組織中TLR4、FasL和EGFR的表達。所有患者臨床資料完整，并且術(shù)前均未接受過化療、放療或免疫治療。58例患者中，男38例，女20例，22～83歲，中位年齡61歲;結(jié)腸癌56例，直腸癌2例;高分化9例，中分化34例，低分化15例;Duke's分期:A期14例，B期14例，C期14例，D期16例。25例人正常大腸組織標本均由結(jié)腸鏡活檢取得。TLR4單克隆抗體的工作濃

4、度為1∶300，F(xiàn)asL多克隆抗體和EGFR單克隆抗體的工作濃度均為1∶400，其余步驟均嚴格按照試劑盒說明書操作，選用磷酸鹽緩沖液替代上述抗體做陰性對照。通過Spearman's等級相關(guān)分析，探討TLR4與FasL或EGFR表達的關(guān)系。通過x2檢驗分析TLR4在結(jié)直腸癌組織中的表達與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系。
　　 結(jié)果:
　　 1.TLR4、FasL和EGFR在結(jié)直腸癌及正常大腸組織中的表達情況:TLR4表達主要定位于結(jié)

5、直腸癌細胞和正常腸粘膜細胞的胞漿和胞膜，胞核無表達，呈黃色顆?；驁F塊。大部分正常腸粘膜細胞呈陰性表達，少數(shù)陽性表達，呈淡黃色顆粒。TLR4在結(jié)直腸癌組織中的表達陽性率為59％(34/58)，顯著高于其在正常大腸粘膜組織中的表達陽性率20％(5/25)(x2=10.461，P＜0.01)。FasL和EGFR主要在結(jié)直腸癌細胞的胞質(zhì)和胞膜表達，細胞核內(nèi)未見表達。EGFR偶見在結(jié)直腸癌間質(zhì)中表達。陽性表達呈黃色顆粒或團塊。FasL和EGFR在

6、結(jié)直腸癌中的表達陽性率分別為71％和83％，均明顯高于在正常大腸組織中的表達陽性率（分別為22％和31％），差異均有統(tǒng)計學(xué)意義(x2=5.018，P＜0.05;x2=3.708，P＜0.05)。
　　 2.通過分析TLR4在結(jié)直腸癌組織中的表達與臨床病理學(xué)特征的關(guān)系顯示，TLR4的表達與結(jié)直腸癌患者的年齡、性別、結(jié)直腸癌的分化程度和局部淋巴結(jié)轉(zhuǎn)移不顯著相關(guān)，TLR4的表達與結(jié)直腸癌的遠處轉(zhuǎn)移具有相關(guān)性(x2=4.063，P＜0.

7、05)。
　　 3.通過分析TLR4表達與FasL、EGFR表達的關(guān)系得出，TLR4和FasL表達具有正相關(guān)性(r=0.249，P＜0.01)，而且在同一樣本連續(xù)切片中，TLR4表達強的部位多伴有FasL的強表達，TLR4表達弱的部位也常伴隨FasL的弱表達。TLR4與EGFR的表達不具有相關(guān)性(r=0.345，P＞0.05)，并且在同一樣本連續(xù)切片中，TLR4和EGFR的表達部位也基本不一致。
　　 結(jié)論:
　　

8、 1.TLR4表達與結(jié)直腸癌遠處轉(zhuǎn)移有關(guān)，提示TLR4可能促進結(jié)直腸癌轉(zhuǎn)移。該指標可以作為判斷結(jié)直腸癌遠處轉(zhuǎn)移的依據(jù)之一。
　　 2.TLR4在結(jié)直腸癌組織中的表達與FasL具有正相關(guān)性，TLR4的表達隨FasL的表達增強而增強。結(jié)合文獻報道，推測TLR4可能通過調(diào)控FasL的表達，參與結(jié)直腸癌的免疫反擊，促進結(jié)直腸癌的生長和轉(zhuǎn)移。
　　 3.本實驗中TLR4在結(jié)直腸癌組織中的表達與EGFR的表達不具有相關(guān)性。TLR4