1、下腰痛發(fā)病率較高，并造成巨大的社會(huì)經(jīng)濟(jì)損失，大約有75％到80％的人一生中發(fā)生過下腰痛，椎間盤退變(DDD)是其主要原因?，F(xiàn)在的治療方法有保守治療和手術(shù)治療，主要針對(duì)的是患者的臨床癥狀，而不是針對(duì)疾病的病理過程。隨著分子生物學(xué)技術(shù)的發(fā)展，在細(xì)胞水平治療DDD有望成為現(xiàn)實(shí)。 DDD的病因?qū)W和病理生理學(xué)尚不十分清楚。己知正常髓核中富含蛋白多糖和Ⅱ型膠原，纖維環(huán)富含Ⅰ型膠原。早期DDD由髓核中蛋白多糖減少引起。在生物化學(xué)水平，蛋白多糖

2、減少反應(yīng)了髓核細(xì)胞合成和分解代謝的失衡，隨著基質(zhì)中蛋白多糖減少，髓核脫水、高度降低使椎間盤承載能力下降，從而影響脊柱的生物力學(xué)性能。雖然DDD包含了很多生物化學(xué)和生物力學(xué)因素，但通過治療來增加蛋白多糖含量，從而增加其含水量及生物力學(xué)性能是有潛在治療效果的。1991年Thompson等發(fā)現(xiàn)胰島素樣生長因子(1GF-1)、表皮樣生長因子(EGF)、轉(zhuǎn)化生長因子-p(TGF-p1)能使體外培養(yǎng)的犬椎間盤細(xì)胞增加蛋白多糖的合成，并提出用生長因子

3、治療DDD。 實(shí)驗(yàn)?zāi)康模?(1)經(jīng)皮穿刺抽吸術(shù)誘發(fā)兔椎間盤變性，驗(yàn)證椎間盤結(jié)構(gòu)缺失導(dǎo)致椎間盤退變的理論。 (2)找出分離退變髓核細(xì)胞的簡(jiǎn)單易行的辦法 (3)觀察在體外培養(yǎng)條件下，退變髓核細(xì)胞的生長情況。 (4)觀察TGF-β1和IGF-1對(duì)髓核細(xì)胞的生物學(xué)活性影響 方法：本實(shí)驗(yàn)首先將兔椎間盤進(jìn)行穿刺抽吸使其變性，2周后采用胰酶+膠原酶聯(lián)合消化法分離該椎間盤的髓核細(xì)胞，分離所獲細(xì)胞用DMEM

4、/F12混合培養(yǎng)基進(jìn)行單層培養(yǎng)。臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定活力，觀察細(xì)胞倍增時(shí)間。 人退變髓核細(xì)胞分離后同上述培養(yǎng)，臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定活力，觀察其生長狀況，記錄細(xì)胞數(shù)目倍增時(shí)間，用免疫組化和考馬斯亮藍(lán)測(cè)定法觀察細(xì)胞在生長因子干預(yù)下合成Ⅱ型膠原能力的改變。 結(jié)果：兔變性髓核細(xì)胞和正常髓核細(xì)胞倍增時(shí)間相同，髓核細(xì)胞體外傳代后活力下降。人髓核細(xì)胞臺(tái)盼藍(lán)染色測(cè)定活力在90％～95％，傳代后活力減弱。加入TGF-β1和IGF-1干預(yù)，細(xì)胞合成Ⅱ型

5、膠原含量增加，聯(lián)合使用效果更加明顯。TGF-β1和IGF-1干預(yù)細(xì)胞活性具有時(shí)間依賴性。 結(jié)論： (1)經(jīng)皮穿刺抽吸術(shù)可以造成兔椎間盤變性，驗(yàn)證了椎間盤結(jié)構(gòu)缺失導(dǎo)致椎間盤退變的理論 (2)胰酶+膠原酶聯(lián)合消化法，能夠在短時(shí)間內(nèi)得到高活率細(xì)胞，膠原酶的聯(lián)合使用，可以更好的解釋退變椎間盤組織中膠原成分的改變。 (3)證明一定濃度的TGF-β1和IGF-1在短期內(nèi)能夠部分改善退變的髓核細(xì)胞的生物學(xué)活性，兩種藥物