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![金魚草養(yǎng)分吸收積累規(guī)律及遺傳轉(zhuǎn)化體系初探.pdf_第1頁](https://static.zsdocx.com/FlexPaper/FileRoot/2019-3/1/8/e8eda574-2ddf-45c7-86a3-665fd9097c5d/e8eda574-2ddf-45c7-86a3-665fd9097c5d1.gif)
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文檔簡介
1、金魚草(Antirrhinum majus L.)屬于玄參科金魚草屬,具有花型奇特、花色豐富艷麗、生長周期短、易于栽培管理等特點,是花壇、花境及切花常用的草本花卉,金魚草也是研究分子生物學和遺傳學,特別是花器官形成、花色素、轉(zhuǎn)座子等方面的重要模式植物。目前,金魚草在新品種培育、組織培養(yǎng)、切花保鮮等方面的研究取得了一系列成果,但隨著金魚草應(yīng)用范圍擴大及新品種的不斷研發(fā)和更新,有關(guān)營養(yǎng)元素及養(yǎng)分管理方面的研究報道較少,并且作為模式植物,對金
2、魚草的分子研究主要集中在花器官模型的建立,對于基因轉(zhuǎn)化的研究并不深入。因此,本試驗對金魚草不同生長發(fā)育階段養(yǎng)分吸收特性及不同器官的養(yǎng)分分配差異進行研究,為金魚草生產(chǎn)栽培提供參考;并利用組織培養(yǎng)技術(shù)建立高效再生體系,在此基礎(chǔ)上,利用根癌農(nóng)桿菌介導法篩選出有利于金魚草下胚軸轉(zhuǎn)化的最適轉(zhuǎn)化條件。試驗結(jié)果如下:
(1)明確了金魚草養(yǎng)分吸收特性和分配規(guī)律。金魚草總干物質(zhì)累積量在整個生長階段呈上升趨勢,單株干物質(zhì)累積量變化范圍是0.2~3
3、.39g,累積最快時期是花期和果期。不同器官干物質(zhì)累積量由大到小為葉>莖>花>根>蒴果;各個生育階段累積率由大到小為盛花期>末花期>果期>初花期>蕾期>花芽分化期>苗期。通過對金魚草養(yǎng)分吸收特性研究,結(jié)果表明金魚草植株中全C、全K含量隨生物期推進總體含量呈增加趨勢,全N、全P含量呈波動趨勢,植株對全C、全N、全P和全K養(yǎng)分含量變化范圍分別為113.30~2127.27 g/kg,86.73~118.81 g/kg,13.45~28.10
4、 g/kg,62.97~104.76 g/kg,累積量大小順序為C>K>N>P。金魚草不同器官對元素吸收量及最大吸收時期也有所不同,苗期到初花期,莖、葉中各種營養(yǎng)元素含量都逐漸升高,開花后,隨著蒴果的形成,全C、全N含量略有下降,養(yǎng)分逐漸向生殖器官轉(zhuǎn)移,養(yǎng)分累積率主要集中在蕾期和花芽分化期,其中蕾期,C、P最大累積率分別是26.41%和33.26%;花芽分化期N最大累積率是27.32%;盛花期K最大累積率為26%,因此說明蕾期是金魚草生
5、長及養(yǎng)分調(diào)控管理的關(guān)鍵時期。
(2)建立了金魚草組織培養(yǎng)再生體系。以金魚草種子為試驗材料,探究了種子最佳消毒時間,下胚軸、子葉分化的最適宜培養(yǎng)基,以及不同激素配比對葉片分化、莖段再生和不定芽生根誘導的影響,結(jié)果表明:利用2%NaClO對金魚草種子消毒6min效果較好,誘導下胚軸分化的最適宜培養(yǎng)基是MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1,分化率和出芽數(shù)分別為96.67%和2.61;子葉的分化能力低于下胚軸
6、,在MS+6-BA1.0 mg·L-1+NAA0.1 mg·L-1培養(yǎng)基中,分化率僅為0.08%;莖段在MS+ZT1.0 mg/L+NAA0.01mg/L培養(yǎng)基中分化率達到最大(93.33%),出芽數(shù)為5.13;葉片在誘導分化時最適宜培養(yǎng)基是MS+6-BA7.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1,分化率、出芽數(shù)分別為12.22、1.61;1/2MS培養(yǎng)基添加NAA0.05 mg·L-1最有利于無菌苗生根,移栽后植株生長狀況良好,
7、成活率100%。
(3)初步建立了金魚草遺傳轉(zhuǎn)化體系。結(jié)果表明,Hyg4 mg·L-1、2 mg·L-1分別是下胚軸分化和植株生根的最適篩選濃度,Cef400 mg·L-1是抑制農(nóng)桿菌生長的最適濃度。農(nóng)桿菌介導的金魚草轉(zhuǎn)化程序為:下胚軸預培養(yǎng)2d,將活化的農(nóng)桿菌(OD600為0.5~0.6)離心后,用等體積無菌水懸浮稀釋,侵染下胚軸5min,共培養(yǎng)40h后,接種到MS+6-BA2.0 mg·L-1+NAA0.2 mg·L-1+
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