白藜蘆醇對HepG2細胞中CYP2E1活性的調節(jié)作用及效應研究.pdf_第1頁
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文檔簡介

1、目的:觀察白藜蘆醇對乙醇誘導的CYP2E1酶活性變化的影響,以及白藜蘆醇對人肝癌HepG2細胞株(hepatoma carcinoma cell,HepG2)生長的影響和誘導其凋亡的作用。
  方法:利用白藜蘆醇與HepG2共同培養(yǎng)建立細胞實驗模型,用RPMI1640培養(yǎng)基培養(yǎng)HepG2,取生長良好的3~6代細胞進行實驗。①首先觀察白藜蘆醇對乙醇誘導的CYP2E1酶活性變化的影響,實驗分組:乙醇組(終濃度分別為50,100,150

2、mmol/L)、白藜蘆醇組(終濃度分別為12.5,25,50,100,150μmol/L)和空白對照組,應用RT-PCR、Western blot技術檢測白藜蘆醇對乙醇誘導的CYP2E1活性變化的影響。②觀察白藜蘆醇對人肝癌HepG2細胞株(hepatoma carcinoma cell,HepG2)生長的影響和誘導其凋亡的作用,實驗分組:白藜蘆醇組(終濃度分別為12.5,25,50,100,150μmol/L)和對照組(空白對照組不加

3、任何藥物,溶劑對照組加入等體積的DMSO),應用MTT比色法檢測細胞存活率;AO/EB雙染色法觀察凋亡細胞形態(tài)學;流式細胞技術檢驗細胞凋亡率及細胞周期。
  結果:
  1.與空白對照組相比,乙醇能誘導HepG2細胞中CYP2E1活性增高,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05);與乙醇組相比,低濃度(12.5μmol/L)白藜蘆醇對乙醇此種作用的抑制效果不明顯,中高濃度(25~150μmol/L)白藜蘆醇能明顯的抑制這一現(xiàn)象。差異

4、有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  2.與溶劑對照組相比,不同濃度白藜蘆醇均能對HepG2細胞的生長起到一定程度的抑制作用,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05)。
  3.與溶劑對照組相比,不同濃度白藜蘆醇均能誘導HepG2細胞凋亡,差異有統(tǒng)計學意義(P<0.05),并發(fā)生明顯的形態(tài)學改變,同時白藜蘆醇能影響細胞周期,使細胞停止生長于G1期。
  結論:
  1.乙醇能明顯誘導肝臟腫瘤HepG2細胞內CYP2E1酶活

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