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文檔簡介
1、目的:觀察AKF-PD對大鼠肝星狀細胞增殖的影響,初步探討其機制。
方法:
1.原位灌流法從S-D大鼠肝臟內分離原代大鼠肝星狀細胞。
2.分離培養(yǎng)14天的原代肝星狀細胞分為:正常組、模型組(10ng/ml PDGF)、200μg/ml AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+200μg/ml AKF-PD)、400μg/ml AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/mlA
2、KF-PD),藥物預處理24小時后加入PDGF10ng/ml繼續(xù)培養(yǎng)24小時,MTT法檢測AKF-PD對大鼠肝星狀細胞增殖的影響。
3.將分離培養(yǎng)14天的原代肝星狀細胞分為正常組、模型組(10ng/ml PDGF)、AKF-PD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/ml AKF-PD)、PFD治療組(10ng/ml PDGF+400μg/ml PFD)。藥物預處理24小時后加入PDGF10ng/ml繼續(xù)培養(yǎng)24小時
3、,提取細胞蛋白,Wesern Blot法檢測CyclinD1、CyclinE、P27Kipl蛋白表達。
結果:
1.與正常組比較,模型組肝星狀細胞吸光度值顯著增加;與模型組比較,不同濃度的AKF-PD治療組肝星狀細胞吸光度值均明顯下降,且400μg/ml AKF-PD治療組較200μg/ml AKF-PD治療組下降明顯。
2.與正常組比較,模型組肝星狀細胞CyclinD1、CyclinE表達明顯
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